Очередной десяток лет квалифицированные медики мира искусственно производят хетчинг эмбрионов для лечения бесплодия, когда просто экстракорпоральное оплодотворение уже не помогает. Что это такое?
Процесс оплодотворения сложнее, чем думает большинство.
Однако на начальной стадии развития эмбрион заключен в специальную гликопротеиновую оболочку (Zona pellucida). Говоря коротко, ее предназначение - удержание всех клеток зародыша в одном месте и защита яйцеклетки от многократного проникновения сперматозоидов. Также она служит своеобразным маяком для клеток спермы, показывающим путь к заветной цели. Спустя несколько дней (обычно 5) эмбрион покидает ее - это и есть хэтчинг (от английского слова hatching - вылупление).
Эмбрион выбирается из оболочки 2 способами: механическим, когда он в форме бластоцисты как бы надувается от наполнения своей полости водой и разрывает оболочку изнутри, и химическим, когда с выделением специальнонго фермента бластоциста вылезает из оболочки через разжиженное отверстие. Раннее освобождение из Zona pellucida чревато развитием однояйцевых близнецов.
Эмбрион выбирается из оболочки 2 способами:
Раннее освобождение из Zona pellucida чревато развитием однояйцевых близнецов.
Утолщение стенки оболочки
Причин не так много:
Все вышесказанное становится непреодолимым препятствием к желанию забеременеть, будь то естественный путь или искусственный. Если эти пункты про вас, то врач с соглашения пациента дает добро на процедуру.
Вспомогательный хэтчинг или последняя надежда для беременности
Хэтчинг, в первую очередь, естественный процесс при оплодотворении. Но врачам под силу провести процедуру искусственно. Это называется вспомогательный хэтчинг. При ЭКО это последний шанс на оплодотворение, гарантирующий 35% успеха. Суть - в искусственном разрыве блестящей оболочки, заключающей эмбрион.
Проводится 4 способами:
Сначала эмбрион извлекается и фиксируется специальной пипеткой. Затем при помощи очень тонкой полой иглы наносится кислотный раствор, разжижающий внешнюю оболочку. Врач дожидается, когда раствор образует небольшое отверстие. Когда оно образовалось, эмбрион промывают и помещают в инкубатор. После выведения зародыша выполняется процедура пересадки его в матку, где он имплантируется и начнет дальнейшее развитие.
Этот способ не рекомендован к применению, поскольку используемый препарат помимо малого процента успешного рождения ребенка токсичен для эмбриона, участвующего в процессе.
Используются вещества, содержащие специальные ферменты. Принцип не отличается от предыдущего. Воздействуя, они так же разжижают оболочку, и позволяют эмбриону «проклюнуться».
Беря в руки микроинструменты, специалисты разрывают оболочку. Выполнять процедуру микроинструментами рискованно: могут повредиться клетки зародыша. Наиболее безопасным считается использовать пьезо-механическую машину и настроить ее вибрацию на максимальную частоту. Это оставляет небольшие углубления на стенке Zona Pellucida. Чтобы эмбрион смог выйти из нее без проблем, нужно сделать от 5 до 8 углублений.
На оболочку направляют пучки инфракрасного излучения.
Лазерный способ выполнения этой процедуры используется чаще всех, и он эффективен по причине наибольшего числа успешных относительно всех проведенных.
Способ делится на 2 метода: бесконтактный и контактный. При бесконтактном инфракрасный луч направлен по касательной относительно оболочки, а при контактном - прямо на нее, создавая сквозное отверстие.
Процедура выполняется с помощью точного лазера. Отсутствие отрицательных результатов при ЭКО доказывают его безопасность.
Показания к процедуре
Вспомогательный хетчинг считают очень длительной и нудной процедурой. Параллельно процент успеха зависит от пациентки, поэтому луч надежды коснется не каждой женщины. Исследования хетчинга проводили многократно, и зачастую доказывали: в одних ситуациях это единственная панацея, а в других он не имеет смысла, потому что ни на что не повлиял. В итоге результаты исследований свелись к нескольким показаниям, при которых хетчинг имеет смысл в процессе ЭКО:
Какой-либо пункт из вышеперечисленных уже большой повод для этой процедуры. Она безопасна для женщины, желающей забеременеть, и для ребенка, который родится в результате. В итоге проблема бесплодия может решиться.
Процент успеха
Часть исследований, опубликованных в научных изданиях и сравнивающих показатели беременности при процедурах экстракорпорального оплодотворения с помощью вспомогательного выведения и без него, показали, что процент успешности первой процедуры выше, чем у второй. Также при использовании вспомогательного вывода в искусственной беременности значительно ускоряет скорость выведения и внедрения эмбрионов и наступающей после этого беременности, в отличие от других подобных программ, при прохождении которых больше велик шанс повредить эмбрион, чем забеременеть. Этим доказывается важность операции по ЭКО, в которой нужно проводить вспомогательный хэтчинг, однако ее желательно проводить в специализированных клиниках в центре страны, где с вами будут работать врачи-эмбриологи с опытом.
Получаемые при процедурах некоторые показателей беременности в виде процента успеха выведения зародыша или вероятности живорождения будущего ребенка при экстракорпоральной беременности будут варьироваться в зависимости от той методики вспомогательного хэтчинга, который проводится в клинике. Среди других значимых факторов - общее качество лаборатории, навык лечащих и консультирующих врачей, опыт работы в культивировании эмбриона у врача, а также многие другие.
К перечисленным достоинствам нужно добавить одно главное. То, которое порой вселяет надежду лучше, чем числа, проценты и умные термины - пациентка, согласная на эту процедуру, мало рискует своим здоровьем. Единственной маловероятной утратой, возможно, будет отрицательный результат, и никакой ребенок не родится из вашего животика.
Однако давайте следовать народной мудрости: «Кто не рискует - тот не пьет шампанское». Если вам дороже рождение ребенка, то стоит свеч эта процедура. Пробуйте.
Успехов вам!
Видео: Др. Елена Березовская – Вспомогательный хэтчинг перед ЭКО
Ученые стремятся повысить эффективность ЭКО, поэтому при проведении обследований было установлено, что неспособность бластоцист выйти из прозрачной оболочки из-за ее утолщения или затвердевания может быть одной из причин неудачной имплантации. Именно поэтому в 1990 г. была изобретена новая технология, которая применяется в протоколе ЭКО и ИКСИ-хетчинг эмбрионов.
После оплодотворения яйцеклетки в естественных условиях она начинает медленное передвижение по маточным трубам к полости матки. За это время внутри нее происходит сложный процесс деления клеток и формирование бластоцисты. Для того чтобы яйцеклетка не повредилась во время перемещения, ее окутывает “оболочка”, которая называется зона пеллюцида. В природе этот блестящий непористый слой окружает яйцеклетку и развивающегося эмбриона примерно до 6 дня развития, после которого происходит естественный хетчинг: эмбрион растет, на стенки оболочки идет определенное давление, она истончается и прорывается, а освобожденная бластоциста имплантируется в слизистую оболочку матки.
Вспомогательный хетчинг- механическое рассечение лазером, тонкой иглой или кислотным раствором Тироде оболочки бластоцисты до необходимого размера (15-20 мкм).
Кому показана процедура
Самыми распространенными показаниями для того, чтобы провести вспомогательный хетчинг при процедуре ЭКО являются:
- Возрастной фактор (женщина старше 35 лет);
- Количество полученных яйцеклеток;
- Повышенный уровень гормона ФСГ, низкий АМГ;
- Низкое качество эмбриона;
- Отсутствие естественного хетчинга;
- Толстая или затвердевшая внешняя оболочка (пеллюцида);
- Криоконсервация эмбрионов и ооцитов;
- Неудачные предыдущие попытки ЭКО.
Как правило, женщина для того чтобы забеременеть использует любую возможность и надеется только на лучшее, и если репродуктолог предлагает эту процедуру, значит пациентке она необходима.
Как проводится процедура
Хэтчинг проводится в лаборатории эмбриологом под микроскопом с помощью микроскопических инструментов и роботизированной помощи. Эмбрионы для операции отбираются, основываясь на предшествующих попытках ЭКО, при этом учитывается возраст матери, базальные уровни ФСГ, частота дробления и морфология эмбрионов.
Существуют три основные техники проведения хетчинга при ЭКО:
- С помощью раствора Тироде:
Эмбрионы в микрокаплях помещаются в минеральное масло на лабораторном стекле, после с помощью шприца по одному перемещаются напротив фиксационной пипетки. Эмбриолог, держа кончик иглы поближе к зоне разрыва, осторожно выпускается кислый раствор. Введение раствора прекращается сразу после прохождения или размягчения внешней оболочки, бластоциста отмывается около 1-4 раз в специальном растворе и помещается в пробирку. Аналогично процедура продолжается для следующего эмбриона. - С помощью лазера:
Этот метод бесконтактный. Эмбрион помещается на лабораторное стекло, цветным кругом выделяется зона разрыва. Срабатывая в импульсивном режиме 3 раза, лазер испаряет или растворяет зону пеллюцида, после производится перенос. - С помощью иглы
При помощи микроиглы эмбриолог производит небольшое иссечение внешней оболочки под определенным углом.
Каждый из методов имеет свои недостатки, ведь тепло, выделяемое лазером, может нагреть клетки и тем самым разрушить их, поэтому так важна правильная настройка аппарата. Раствор Тироде или игла при неопытности эмбриолога также могут повредить клетки.
Перенос эмбрионов после любого метода сопровождается иммуносупрессивной и антибиотикотерапией за 2 дня до переноса и в течение 5 дней после. Бластоцисты должны быть перенесены в полость матки на 3-е сутки, через 5-7 часов после проведения операции. Перенос должен производиться предельно аккуратно, так как бластомеры могут выйти через получившиеся отверстия.
Шансы на успешное зачатие после хэтчинга
Некоторые врачи считают, что использование вспомогательных технологий приводит к повышению частоты наступления беременности только в отдельных случаях. Другие утверждают, что нет никаких убедительных доказательств того, что хэтчинг помогает улучшить шансы на зачатие. Не стоит забывать так же и о том, что во время проведения иссечения эмбрион может быть поврежден, а эмбриолог не заметит этого, соответственно, успешной имплантации не произойдёт.
Можно сделать вывод, что успешная беременность в протоколе ЭКО зависит от используемой техники, оснащенности лаборатории, квалификации и опыта эмбриолога, аккуратности во время переноса эмбрионов в полость матки, а также других факторов.
С 2014-2016 г.г. американскими учёными проводились исследования женщин, получивших вспомогательный хэтчинг в протоколе ЭКО и ИКСИ с использованием свежих эмбрионов. Полученные в результате результаты считаются достаточно обнадеживающими и представлены в таблице ниже.
Статистика проведения хетчинга
Из исследования видно, что чем старше женщина, тем меньше ее шансы на успешную имплантацию даже применяя иссечение внешней оболочки.
По предположениям специалистов проблемы с разрывом оболочки (хэтчингом) затрудняют наступление беременности. Поэтому в передовых клиниках репродуктивной медицины предлагают процедуру вспомогательного хэтчинга. Она представляет собой микро-манипуляцию, при которой в зоне пеллюцида, непосредственно перед имплантацией эмбриона, искусственно проделывают отверстие. Это облегчает разрыв оболочки и является дополнительным фактором, способствующим наступлению беременности.
Специалисты уверены, что вспомогательный хэтчинг при ЭКО повышает вероятность беременности у пациенток старшего возраста, у женщин с необъяснимой этиологией бесплодия, а также у пар, уже имевших неудачные попытки ЭКО .
Показания к процедуре
Многим женщинам врачи назначают вспомогательный хетчинг при ЭКО. Что это дает? Процедура позволяет повысить шансы на успешное зачатие. Вот почему в случае необходимости нужно обязательно использовать хетчинг в программе ЭКО. Что это за процедура, и насколько она увеличивает вероятность оплодотворения в тех или иных ситуациях?
В медицинской научной литературе можно найти данные о том, что у женщин старшего репродуктивного возраста зона пеллюцида характеризуется повышенной плотностью. Именно это затрудняет естественное «вылупление» эмбриона. При работе с такими пациентами вспомогательный хетчинг повышает процент наступивших беременностей, в то же время у более молодых женщин процедура заметного влияния на успешность ЭКО не оказывает.
Иногда на форумах необоснованно критикуют хетчинг при эко: что это бесполезная процедура и напрасная трата денег. Это неверно. В некоторых ситуациях он является настоящим спасением для женщин, которые хотят, но не могут иметь детей.
Важные факторы
При решении вопроса о необходимости искусственного разрыва оболочки эмбриона медики руководствуются такими факторами, как:
- возраст пациентки
- уровень ФСГ периферической крови
- количество бластомеров
- тип и процент фрагментации бластомеров
- толщина зоны пеллюцида
Вспомогательный хэтчина проводится всегда, когда зафиксирован повышенный базальный уровень ФСГ периферической крови пациентки. Кроме того процедура показана при увеличенной плотности зоны пеллюцида (выше 18 нм), которая зависит не только от возраста женщины, но и от длительности стимулирующих овуляцию мероприятий.
Довольно типичная, увы, история - успешно пройдены все этапы программы ЭКО, получены отличные эмбрионы, 1-2 лучших из них перенесены в полость матки, однако беременность почему-то не наступила. Причин этого может быть довольно много. Одна из возможных причин – неспособность эмбриона «вылупиться» из окружающей его блестящей оболочки (zona pellucida). Блестящая оболочка яйцеклетки и, впоследствии, эмбриона состоит из гликопротеидов, обладает свойствами эластичности и прозрачности и несет 2 основных функции – предотвращает проникновение более одного сперматозоида в яйцеклетку при оплодотворении, а также удерживает клетки развивающегося эмбриона вместе в процессе дробления.
Естественный процесс вылупления или хэтчинга происходит на 5-6 день развития, когда эмбрион достигнет стадии бластоцисты - на этой стадии эмбрион состоит из 50 и более клеток, образующих 2 субпопуляции – трофэктодерма – наружный слой клеток, ответственный за имплантацию и развитие внезародышевых оболочек, и внутренняя клеточная масса (ВКМ), из которой впоследствии образуются все эмбриональные ткани. В бластоцисте имеется внутренняя полость, которая увеличивается по мере роста и развития эмбриона, приводя к истончению блестящей оболочки бластоцисты (фото 1).
Когда объем полости достигает максимально возможного, бластоциста начинает «пульсировать» - сжиматься и вновь расправляться.
В какой-то момент оболочка прорывается и бластоциста постепенно «выползает», выклевывается из оболочки (фото 2).
Стоимость услуги "Вспомогательный хэтчинг" в клинике "АРТ-ЭКО": 3 000-00 руб.
Процесс хэтчинга занимает от нескольких часов до суток. Только по окончании его эмбрион может приступить к следующему важнейшему этапу – имплантации (фото 3).
В ряде случаев процесс естественного хэтчинга затруднен в силу толщины оболочки или химических изменений в ней. В таком случае рекомендуют сделать искуственное отверстие либо истончить блестящую оболочку, а в некоторых случаях – даже полность удалить.
Вот список возможных показаний к проведению вспомогательного хэтчинга:
- эмбрионы, перенесшие криоконсервацию, либо полученные при оплодотворении криоконсервированных ооцитов;
- аномально толстая или неравномерная по толщине блестящая оболочка;
- возраст старше 38 лет;
- несколько неудачных попыток ЭКО в анамнезе с отсутствием имплантации и хорошим качеством перенесенных эмбрионов и эндометрия;
- необходимость в проведении преимплантационной генетической диагностики.
Однако, все показания кроме последнего не являются абсолютными, а выполнение вспомогательного хэтчинга без показаний не приводит к увеличению частоты наступления беременности.
Существует четыре типа вспомогательного хэтчинга по типу воздействия на блестящую оболочку – химический, механический, лазерный и энзиматический. Первые три типа выполняют на микроскопе при помощи специальных микроинструментов.
При химическиом хэтчинге используют кислый раствор Тиродэ с очень низким уровнем рН (2.4). Этим раствором точечно воздействуют на блестящую оболочку, растворяя ее в месте соприкосновения. Механический хэтчинг выполняют при помощи заостренной тонкой микропипетки, которой подцепляют оболочку, а затем делают отверстие крест-накрест. При энзиматическом хэтчинге оболочка эмбриона (как правило на стадии бластоцисты) полностью растворяется при помощи фермента проназы.
Наиболее распространенным и современным методом является лазерный хэтчинг. Его выполняют на инвертированном микроскопе, оснащенном инфракрасным диодным лазером с длиной волны 1480 нм. Такой лазер позволяет без риска для эмбриона делать отверстия любого размера в блестящей оболочке. В настоящее время наиболее часто встречается метод секторального истончения, сглаживания оболочки при помощи лазера (фото 4).
Медицина добилась неплохих результатов в области искусственного оплодотворения. К сожалению беременность при ЭКО наступает не у каждой женщины. Чтобы понять, что такое хетчинг эмбрионов в эко, специалисты объясняют процесс выхода эмбриона из его оболочки.
Цель процедуры
Вспомогательный хетчинг перед эмбриопереносом предполагает надрез оболочки для увеличения шанса зачатия. Естественный процесс выхода зародыша из оболочки часто заканчивается неудачей, и причинами становятся ее утолщение или затвердевание.
Процесс проводится под микроскопом, врач делает небольшой надрез на оболочке, после чего вводит оплодотворенную яйцеклетку в полость матки. Таким образом специалисты помогают прикрепиться эмбриону для дальнейшего развития плода.
Хэтчинг эмбриона– это мероприятие по освобождению от оболочки, чтобы прикрепиться к стенке матки. Проблемы с этим действием, часто приводят к женскому бесплодию. Целью такой процедуры является устранение проблемы, связанной с выходом из оболочки оплодотворенного эмбриона.
Хетчинг при эко применяется в исключительных случаях, и не входит в основную программу искусственного оплодотворения.
В естественных условиях яйцеклетка после оплодотворения выходит из оболочки на 5 сутки. В промежутке между оплодотворением и прикреплением зародыша к матке применяется вспомогательный хетчинг.
Показания к процедуре
При лечении бесплодия, в некоторых случаях, применяют хетчинг эмбрионов по медицинским показаниям.
- возраст более 38 лет;
- нарушение естественного хетчинга;
- достаточно высокая толщина оболочки и прочие аномалии ее развития;
- длительный прием гормональных препаратов;
- вредные привычки;
- неудачные попытки ЭКО;
- уровень ФСГ в крови пациентки повышен;
- фолликулостимулирующий гормон превышает нормы;
- криоконсервация ооцитов и эмбрионов.
Противопоказанием к применению такой микрооперации является ситуация, когда бластомеры (клетки эмбрионов) не переходят в интерфазу мейоза 1. Процесс выполняется только специалистами в клиниках, оснащенных современным оборудованием.
Хетчинг в программе эко изначально не предусмотрен как обязательная процедура. Женщине, которой показана эта операция, необходимо понимать ее важность для положительного результата.
Если у женщины были две и более неудачных попыток оплодотворения методом ЭКО, врачи назначают спец процедуру вспомогательного хетчинга, выполненного по одной из методик. Это в разы увеличивает вероятность, что имплантация зародыша будет успешной, и женский организм примет оплодотворенную яйцеклетку.
Методы выполнения
Хэтчинг после криозаморозки позволит в несколько раз повысить шанс успешной имплантации зародыша в матку и наступления беременности у женщины, решившейся на ЭКО. Хетчинг при криопереносе выполняется несколькими способами.
Каждый метод имеет свои особенности и недостатки:
- механический;
- химический;
- лазерный;
- пьезо-методика.
Механический. В этом случае специалист проводит рассечение оболочки вручную, используя микроскопическую иглу. Прокол производится под определенным углом, за счет чего образуется маленькая прорезь. Этот прием практически не имеет осложнений.
Химический. Такой метод предполагает использование специального химического раствора, под названием Тироде, который разъедает оболочку. Наносят раствор с помощью иглы под микроскопом. Недостатком метода считается влияние на жизнеспособность эмбриона. Чтобы не навредить зародышу, после процедуры его тщательно промывают.
Вспомогательный лазерный хетчинг. Он выполняется очень тонким лучом лазера бесконтактным способом. Именно лазерный хетчинг эмбрионов считается самым точным и безопасным для плода. Эффект от использования лазера намного выше, чем от других видов. Лазерный вспомогательный хетчинг имеет лишь один недостаток – оборудование для его проведения очень дорогостоящее.
Пьезо-методика. Современный способ, основанный на воздействии на эмбрион пьезоэлектрическим микроманипулятором. Это позволяет истончить стенки оболочки и помочь оплодотворенной яйцеклетке выбраться и прикрепиться к стенкам матки.
Врач эмбриолог, учитывая все показания пациентки, пришедшей на экстракорпоральное оплодотворение, примет решение в необходимости вспомогательного хетчинга. В некоторых случаях, это единственная возможность помочь яйцеклетке, после оплодотворения и прохождения по маточной трубе, освободиться от оболочки и прикрепиться к стенкам матки.
