Обнаружение бледной трепонемы. Микроскопическое исследование на бледную трепонему

Treponema – род бактерий, объединяющий многочисленные виды, из которых самым распространенным является возбудитель сифилиса – treponema pallidum (трепонема паллидум, бледная трепонема). В этот род также входят возбудители фрамбезии и пинты. Treponema pallidum является спиралевидной бактерией семейства Spirochaetiaceae (спирохеты), вызывающей инфекционное венерическое заболевание - . Патология отличается волнообразным течением и проявляется характерной клиникой. Заражение происходит преимущественно половым путем, благодаря чему сифилис относится к ИППП.

В настоящее время в мире регистрируется огромное количество венерических заболеваний, которые представляют реальную угрозу для жизни человека. Treponema pallidum – опасный микроб, вызывающий системное заболевание, поражающее кожу и внутренние органы. На месте внедрения спирохеты образуется первичный патологический очаг – . Затем на коже появляются сифилитические высыпания, увеличиваются регионарные лимфатические узлы. При отсутствии адекватной терапии поражаются внутренние органы, развиваются необратимые изменения, возможен летальный исход.

Treponema pallidum

Морфология

Treponema pallidum - грамотрицательный микроорганизм, имеющий форму тонкой спирали, скрученной в 8-12 мелких завитков. Свое название бледная трепонема получила благодаря способности не воспринимать обычные лабораторные красители.

Спирохета является строгим анаэробом, хорошо растущим в бескислородной среде. Но не смотря на это, жизнеспособность бактерий сохраняется на окружающих бытовых предметах в течение 3 и более дней. Трепонема имеет жгутики и фибриллы. Благодаря им и собственным сокращениям клетки бактерия совершает поступательные, вращательные, сгибательные, волнообразные, винтообразные и контрактильные движения. Она быстро проникает в живые клетки и стремительно размножается в них поперечным делением.

Бледная трепонема имеет трехслойную клеточную стенку, цитоплазму и органеллы: рибосомы, мезосомы, вакуоли. Рибосомы синтезируют белки, а мезосомы обеспечивают дыхание и обмен веществ. Ферменты и антигены содержатся в цитоплазматической мембране. Тело бактерии покрыто слизистой бесструктурной капсулой, выполняющей защитную функцию.

Физические свойства

Микробы устойчивы к низким температурам и чувствительны к высоким. При нагревании они гибнут в течение 20 минут, при высыхании в течение 15 минут, а при кипячении – мгновенно. Антисептики и дезинфектанты быстро уничтожают бледную трепонему. Губительное действие на бактерию оказывают: ультрафиолет, свет, спирт, щелочи, уксус, мышьяк, ртуть, хлорсодержащие дезинфицирующие средства. Treponema pallidum устойчива к некоторым антибиотикам.

Бледная трепонема проявляет свои патогенные свойства во влажной и теплой среде. В организме человека излюбленным местом размножения являются лимфатические узлы. На стадии вторичного сифилиса микробы концентрируются в крови и проявляют свои патогенные свойства.

Культуральные свойства

Трепонема паллидум не растет на искусственных питательных средах, в культуре клеток и куриных эмбрионах. Ее культивируют в яичках кролика. В этих клетках микроб хорошо растет и размножается, полностью сохраняя свои свойства и вызывая у животного орхит.

Существуют обогащенные питательные среды, предназначенные для выделения чистой культуры. Микробы на них растут под толстым слоем вазелинового масла. Таким способом получают антитела, необходимые для постановки специфических реакций на сифилис.

Трепонемы растут на кровяном или сывороточном агаре в бескислородной среде. При этом они теряют свои патогенные свойства, но сохраняют антигенные. Патогенные трепонемы способны ферментировать маннит, утилизировать лактат и образовывать специфические метаболиты.

Патогенность

К факторам и компонентам патогенности и вирулентности бактерий относятся:

Белки-адгезины, обеспечивающие фиксацию микроба на клетке-хозяина,
Миофибриллы, способствующие глубокому проникновению в организм и миграции бактерии в теле хозяина,
Образование L-форм,
Липополисахариды наружной мембраны,
Фрагменты болезнетворной клетки, проникающие вглубь тканей,
Способность внедряться в межклеточные соединения эндотелия,
Антигенная изменчивость.

Трепонема паллидум оказывает прямое токсическое действие на синтез макромолекул – ДНК, РНК и белков. Антигены Т. pallidum используются в реакции Вассермана для серодиагностики сифилиса. При неблагоприятных условиях спирохета трансформируется в L-формы, которые обеспечивают ее устойчивость к антибактериальным средствам и антителам.

Эпидемиология

Сифилис - строгий антропоноз. Инфекция персистирует только в организме человека, который является ее естественным резервуаром в природе. Входными воротами инфекции являются: поврежденный плоскоклеточный или цилиндрический эпителий ротовой полости или половых органов.

Распространение инфекционных агентов происходит:

Половым путем во время полового акта через сперму,
Бытовым путем через белье, средства гигиены, косметические принадлежности, при поцелуе,
Вертикальным путем от инфицированной матери ребенку во время родов, а также через молоко при кормлении грудью,
Трансплацентарным путем на поздних сроках беременности,
Гематогенным путем при прямом переливании крови, во время операций, при использовании общего шприца у наркоманов.

Риск инфицирования повышен у медицинских работников – стоматологов, косметологов. Заражение происходит при проведении медицинских манипуляций и процедур, повреждающих кожные покровы. Заражаются treponema pallidum лица, ведущие беспорядочную половую жизнь, имеющие несколько половых партнеров, пренебрегающие барьерными методами контрацепции. Для того, чтобы произошло инфицирование, у больного в секрете должно быть много бактерий, а у партнера - должны присутствовать повреждения на слизистой оболочке.

первые проявления болезни

Больной максимально заразен в периоды первичного и вторичного сифилиса, когда на коже и слизистой половых органов появляются первые признаки болезни. В это время в окружающую среду выделяется много спирохет.

В настоящее время регистрируется большое число больных с экстрагенитальными шанкрами, расположенными на слизистой рта, глотки, ануса. У них высыпания локализуются на лице, сифилиды – на ладонях и подошвах. Третичный период сифилиса в последнее время развивается в очень редких случаях и протекает практически бессимптомно.

Симптоматика

Инкубация характеризуется миграцией бактерий по лимфатическим и кровеносным сосудам и их активным размножением в лимфоузлах. Продолжительность периода - от 3 недель до 3 месяцев.

Врожденный сифилис развивается в результате внутриутробного заражения плода. Эта тяжелейшая патология проявляется характерной триадой симптомов у ребенка: врожденной глухотой, кератитом, гетчинсоновыми зубами.

Диагностика

Диагностика сифилиса включает опрос и осмотр пациента, сбор анамнестических сведений, а также клинические испытания, которые играют важную роль в обнаружении бледной трепонемы и постановке диагноза.

Микроскопическое исследование биоматериала. Бактериоскопию мазка-отпечатка шанкра или биоптата лимфатического узла проводят в первые 4 недели болезни. Для получения качественного мазка поверхность эрозии и язвы обрабатывают физраствором, производят соскоб и из полученного материала готовят препарат для микроскопии. Мазок окрашивают по Романовскому-Гимзе. Трепонема имеет бледно-розовый цвет. Живые микробы в неокрашенном и нефиксированном мазке не видны в световой микроскоп. Для их обнаружения применяют темнопольную или фазовоконтрастную микроскопию. Для проведения темнопольной микроскопии берут материал из сифилитической язвы и исследуют его в специальном аппарате. Бактерия обладает способностью преломлять свет: в микроскопе она имеет вид белой спиралевидной полоски. Для обнаружения трепонем в различных клинических материалах применяется также люминесцентная микроскопия.

Лечение

Лечением сифилиса занимается врач-дерматовенеролог. Он подбирает терапию индивидуально с учетом стадии, клиники болезни и особенностей пациента. Комплексное лечение способствует полному выздоровлению, которое должно подтверждаться лабораторно.

Лечение сифилиса этиотропное, направленное на уничтожение возбудителя – treponema pallidum. Больным назначают большие дозы антибиотиков, к которым чувствителен данный микроб. Обычно используют пенициллины «Бензилпенициллин», тетрациклины «Доксициклин», макролиды «Кларитромицин», «Сумамед», цефалоспорины «Цефазолин», фторхинолоны «Ципрофлоксацин». Антибактериальную терапию продолжают 2 месяца. Лечение беременных женщин проводят также.

Иммуностимуляция, витаминотерапия, физиопроцедуры дополняют этиотропное лечение и помогают больным восстановиться после болезни. Превентивная терапия проводится половому партнеру и лицам, контактировавшим с больным.

Видео: дерматовенеролог о лечении сифилиса

Профилактика

Профилактические мероприятия заключаются в соблюдении личной гигиены, использовании отдельного белья и посуды, индивидуальных косметических средств. Рекомендуется сразу после незащищенного полового акта обработать раствором хлоргексидина или альбуцида половые органы или другие части тела, с которыми произошел контакт. Эти средства необходимо иметь в домашней аптечке.

С профилактической целью обследуют:

Доноров,
Беременных женщин,
Работников детских садов, школ, общепита и лечебно-профилактических учреждений,
Больных, поступающих на стационарное лечение.

Современная противомикробная терапия позволяет избавиться от патологии и делает прогноз заболевания благоприятным. Только врач-дерматовенеролог сможет подобрать правильное и достаточное лечение, соответствующее стадии болезни. Заниматься самолечением сифилиса категорически запрещено. Не до конца излеченная патология может перейти в хроническую форму. Такой больной опасен для окружающих лиц.

Сифилис – социальный недуг, к лечению которого нужно подходить серьезно и ответственно.

Видео: сифилис в программе “Здоровье”

Или бледная трепонема это микроорганизм в виде спирали с 8-12 завитков, который имеет клетчатую мембрану, благодаря чему определенный период времени может не терять своей патогенности под влиянием факторов окружающей среды.

Бактерия относится к спирохетам и является возбудителем такого заболевания, как сифилис.

Характеризующие особенности возбудителя

Попав в окружающую среду со слюной, спермой или выделениями из эрозий и язв больного, бледная трепонема способна сохранять свою активность до тех пор, пока не произойдет высыхание вещества, в котором трепонема пребывает.

Возбудитель устойчив к действию высоких температур, 54 градуса выше нуля уничтожают возбудителя только через 15 минут, более высокие цифры становятся пагубными для трепонемы паллидум быстрее. Даже во время кипячения возбудитель не теряет своей активности в течение нескольких секунд. Интересным фактом является то, что при температуре 42 градуса трепонема становится более активной и лишь со временем погибает. Возбудитель сифилиса считается патогенным в течение трех суток, даже если находится в трупном материале.

Высоким уровнем устойчивости обладает бледная спирохета и к воздействию низких температурных показателей, даже в замороженном виде она сохраняет свою патогенность в течение 12 месяцев. Лучшими условиями проживания возбудителя является бескислородная среда и низкая температура.

Бледная трепонема погибает под воздействием дезинфицирующих и некоторых видов антибактериальных средств. Неблагоприятными для бледной спирохеты (приводят к ее гибели) являются:

мышьяк и висмут;
пенициллин;
ртуть;
влияние кислот и щелочей;
попадание на микроорганизм света и ультрафиолетового облучения;
антисептические растворы.

Однако выводы проведенных исследований по устойчивости возбудителя сифилиса к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды указывают на то, что трепонема в некоторых случаях все же может сохранять свою активность и вызывать заболевание даже при проникновении к ней кислорода, при высушивании и попадании лучей света.

Пути передачи

Входными воротами, через которые проникает возбудитель в наш организм, считается травмированная тканевая поверхность слизистых оболочек ротовой полости или половых органов.

Передача бледной трепонемы происходит:

Половым путем — при незащищенных половых отношениях с больным.
Бытовым — в результате использования загрязненных полотенец, белья, косметических средств.
Трансплацентарным — от больной матери к ребенку.
Вертикальным — при прохождении ребенка через инфицированные родовые пути матери.
Гематогенным — при проведении переливания крови и ее компонентов, при оперативных вмешательствах, использовании общего шприца с больным человеком (особенно характерно для наркоманов).

Необходимо заметить, что достаточно высокий риск инфицирования у работников медицинских и косметических заведений, особенно если они осуществляют проведение процедур, связанных с нарушением целостности кожного покрова.

Наибольшее количество случаев заражения диагностируется у лиц, имеющих беспорядочную половую жизнь и не использующих контрацептивов.

Клинические проявления болезни

Обратите внимание, высокий уровень заразности наблюдается у больных при первичном и вторичном сифилисе, который проявляется формированием на кожном покрове и слизистых половых органов первых проявлений болезни. Именно в данный период времени происходит интенсивное размножение и выделение в окружающее пространство бледной трепонемы.

В наше время растет количество больных, у которых сифилис проявляется экстрагенитальными шанкрами, которые локализуются на слизистой оболочке рта, глотки, ануса. Элементы сыпи могут наблюдаться на лице, а сифилиды на ладонной поверхности рук и подошвах.

Сифилис врожденного генеза, как уже отмечалось, формируется в результате заражения ребенка от больной матери еще во время пребывания в ее утробе. Характеризуется присутствием таких патологических симптомов как: врожденная глухота, кератит, гетчисоновые зубы.

Диагностика

Перед тем, как начать лечить больного, врач для постановки верного диагноза и назначения эффективной терапии проводит осмотр пациента и сбор анамнестических данных, а также назначает проведение:

Микроскопического и бактериоскопического обследования мазка взятого с поверхности шанкра (материалом является тканевый экссудат) или биопсийного материала лимфатического узла (но только в первый месяц заболевания). Для лучшей информативности мазка поверхности язв и эрозий предварительно смазывают физраствором, проводят забор материала и готовят препарат для микроскопического исследования. Проводится окраска материала по Романовскому-Гимзе, бледная трепонема при этом приобретает розовый оттенок. Необходимо акцентировать внимание на том, что живые бледные трепонемы в неокрашенном мазке не выявляются под световым микроскопом. В таком случае оправданным считается использование темнопольной или фазоконтрасной микроскопии. Трепонема обладает способностью приводить к преломлению лучей света и выглядит как спиралевидная полоска белого цвета.
Серологических реакций, целью которых является диагностирование антител к возбудителю сифилиса в плазме крови. Чаще всего проводят реакцию Вассермана и реакцию быстрых плазменных реагентов. Данные исследования считаются обязательными и применяются даже при осуществлении медицинского осмотра с профилактической целью в поликлинических медицинских учреждениях.
Реакции иммунофлюоресценции, гемагглютинации, иммобилизации трепонем. Данные исследования отличаются чрезвычайно высоким уровнем чувствительности и точности. Позволяют выявить в крови человека антитела. Например, IgM свидетельствуют о наличии острого воспалительного процесса, IgG указывают на хроническое течение болезни.
Иммуноферментного анализа. Этот метод обследования, как и предыдущие, помогает диагностировать наличие антител к бледной трепонеме. После того, как пройдет 14 дней, в плазме крови начинают проявляться IgM и IgA, а через месяц — IgG (особенностью является то, что именно в этот период их количество находится на пике, с течением времени оно уменьшается).
ПЦР диагностики.

Лечение

При появлении патологических симптомов необходимо обратиться к дерматологу. Лечащий доктор проведет тщательное обследование пациента и назначит индивидуальную схему лечения, которая будет зависеть от тяжести клинических проявлений сифилиса и физиологических особенностей больного. Необходимо заметить, что правильное, полноценное лечение приводит к полному выздоровлению.

Основным направлением лечебной терапии считается уничтожение бледной трепонемы. С этой целью больным назначают антибактериальные препараты в немалых дозах. В большей части случаев применяются препараты из группы:

пенициллинов — Бензилпенициллин;
тетрациклинов — Доксациклин;
макролидов — Кларитромицин или Сумамед;
цефалоспоринов — Цефазолин;
фторхинолонов — Ципрофлоксацин.

Важно! Продолжительность приема лекарств должна составлять не менее двух месяцев.

Параллельно с антибиотикотерапией назначают:

иммуностимуляторы;
витаминно-минеральные комплексы;
пробиотики;
физиотерапевтические процедуры.

Половой партнер больного также в обязательном порядке должен проходить лечение, это позволит предупредить риск повторного заражения. Важным нюансом, который требует особого внимания, считается то, что на период лечения категорически запрещается вести половую жизнь.

Определение эффективности лечения сифилиса считается довольно непростым делом. Объясняется это тем, что практически все клинические проявления болезни исчезают уже при проведении части лечения, но это еще не является подтверждением того, что бледная спирохета погибла. Чтобы узнать вылечился ли больной, необходимо назначить прохождение серологических исследований.

К лечению болезни необходимо относиться со всей ответственностью, ведь она считается асоциальной и может становиться причиной тяжелых осложнений и даже летального исхода.

Меры профилактики

Для того, чтобы предотвратить попадание бледной трепонемы в организм, необходимо:

С особым вниманием следить за личной гигиеной.
Пользоваться только своим бельем.
Использовать индивидуальные косметические средства.
Избегать случайных половых связей. Если же незащищенные отношения все же произошли, нужно как можно скорее провести обработку половых органов раствором Альбуцида или Хлоргексидина от которых бледная спирохета погибает.
Пользоваться барьерными средствами контрацепции.

В обязательном порядке профилактическое проводится:

донорам;
женщинам в период вынашивания ребенка;
лицам, профессия которых связана с пищевой промышленностью;
учителям и воспитателям детских садов;
медицинским работникам;
лицам, поступающим на лечение в стационар.

Подведя итог, необходимо отметить, что благодаря развитию фармацевтической отрасли и применению антибактериальной терапии прогноз сифилиса считается благоприятным. Все что необходимо, это лишь пройти правильное лечение и соблюдать все рекомендации врача. Ни в коем случае не занимайтесь самолечением, ведь это может привести к очень плачевным последствиям.

Вот практически и вся информация о том, что такое бледная трепонема и сифилис, и как необходимо лечить данное патологическое состояние. Надеемся, она будет для вас полезной и поможет разобраться с волнующими вопросами.

Бледная трепонема (Treponema pallidum) является возбудителем сифилиса. Это венерическое заболевание известно с древних времен, однако его возбудитель был открыт только в 1905 году австрийскими учеными Э. Гоффманом и Ф. Шаудином. Его назвали бледной (pallidum) спирохетой.

Имея очень тонкое спиралевидное тело, бледные трепонемы легко проникают через слизистые оболочки и поврежденные кожные покровы в организм человека чаще при половом контакте, в том числе в извращенной форме, значительно реже — контактным путем или непосредственно с кровью. Бледные трепонемы поражают слизистые оболочки, кожные покровы и внутренние органы. После периода размножения на месте внедрения возбудителей сифилиса образуется первичная сифилома ( , «твердая» язва). Течение заболевания волнообразное и поэтапное.

Специфические после манифестного течения самопроизвольно исчезают, а далее вновь появляются, меняя свою окраску. Длительность рецидивирующего течения заболевания протекает около 2-х лет и является важнейшим признаком раннего сифилиса. Сифилиды, лишенные эпителия, содержат большое количество бледных трепонем. С годами заразность больных сифилисом уменьшается.

Бледная трепонема относится к отряду Spirochaetales, семейству Spirochaetaceae, роду Treponema. Спирохеты обладают уникальным строением и морфологией. Они широко распространены в природе. Это тонкие, довольно длинные, гибкие и подвижные бактерии. Патогенными для человека являются четыре подвида Treponema pallidum:

Treponema pallidum pallidum вызывает сифилис.
Treponema pallidum pertenue является причиной фрамбезии (невенерический сифилис, тропическая гранулема).
Treponema carateum вызывает заболевание пинта.
Treponema pallidum endemicum является причиной эндемического сифилиса (невенерический сифилис детского возраста, беджел).

Заболевания, вызванные патогенными трепонемами, имеют хроническое волнообразное течение. Сифилис распространен повсеместно, а пинта, фрамбезия и беджел встречаются только в тропических странах и имеют доброкачественное течение.

Рис. 1. Вид бледной трепонемы в электронном микроскопе.

Устойчивость возбудителей во внешней среде

Бледная трепонема устойчива к низким температурам. До одного года выдерживает замораживание. Хранятся патогенные штаммы возбудителей в бескислородной среде при низких температурах (20 — 70°С) или высушенными из замороженного состояния.
Трепонемы сохраняют свою вирулентность на предметах окружающей среды до момента высыхания. При температуре до 42°С активность бактерий вначале повышается, а затем они погибают. При нагревании до 60°С трепонемы сохраняют свою активность в течение 15 минут. Более 3-х суток возбудители сифилиса сохраняют свои патогенные свойства в трупном материале.
Вне организма человека бактерии быстро погибают. При температуре 100°С они погибают мгновенно. Бледные трепонемы чувствительны к дезинфицирующим средствам и некоторым антибиотикам.

Рис. 2. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции.

Возбудители сифилиса в организме больного

В этот период бактерии находятся в очагах поражения и тканевой жидкости в спиралевидной форме, а сам больной становится распространителем инфекции. Особенно заразны больные во вторичном периоде — периоде рецидивного сифилиса. Периоды затихания заболевания связаны с тем, что большая часть трепонем находится внутриклеточно (в фагоцитах). В таком состоянии бактерии не способны размножаться и распространяться по организму.

Бледные трепонемы способны укрываться от негативного воздействия факторов окружающей среды, превращаясь в L-формы и цисты, что объясняет хроническое течение заболевания. На поздних стадиях сифилиса заразность больных минимальная. Общее количество возбудителей снижено. Реакция организма на инфекцию ослаблена.

Рис. 3. Микроскопия мазка, приготовленного методом серебрения. Возбудители сифилиса имеют темную окраску. В желтый цвет окрашены клетки инфицированных тканей.

Характеристика возбудителя: внешнее строение

Бледная трепонема по внешнему виду напоминает штопор. Она имеет 8 — 14 равной величины завитков, высота которых уменьшается на концах. Спиралевидная форма возбудителя сохраняется во всех случаях и при любых условиях. Длина микроорганизма составляет от 5 до 15 мкм, ширина — 0,2 мкм.

Рис. 4. На фото возбудитель сифилиса Treponema pallidum (вид в электронном микроскопе).

«Концевые» образования

Концы у большинства трепонем заострены. На них расположены выросты дискообразной формы (блефаропласты ) с прикрепленными к ним в количестве 10 — 11 фибриллами.

Фибриллы тянуться вдоль тела трепонемы и обвивают его, обеспечивая бактерии спиралевидную форму. С каждого конца отходит по 2 самостоятельных пучка фибрилл. Они располагаются под наружной стенкой, проходя над цитоплазматической мембраной. Под цитоплазматической мембраной также обнаружены фибриллы. Они более тонкие и многочисленные. Фибриллы наружного пучка обеспечивают трепонеме движение, они в два раза толще. Они представляют собой длинные трубочки, состоящие из белка флагелина, достаточно устойчивого к воздействию ряда ферментов. Фибриллы внутреннего слоя играют роль каркаса.

На одном из концов бактерии имеется два округлых образования (губчатое тело ). Оно обеспечивает активное проникновение бактерий в клетки хозяев.

Бледные трепонемы могут осуществлять поступательные (назад и вперед), вращательные, сгибательные, волнообразные (судорожные) и винтообразные движения.

Рис. 5. На фото бледная трепонема (культуральная форма).

Рис. 6. На фото бледные трепонемы с увеличением в 3000 раз (темнопольная микроскопия). Данный вид исследования позволяет регистрировать форму и движение живых бактерий.

Внутреннее строение бледных трепонем (ультраструктура)

Мукопротеидный «чехол»

Тело бактерии окружено слизевидным бесструктурным веществом (микрокапсулой). Эта мукополисахаридная субстанция защищает трепонемы от фагоцитов и антител. Капсульное вещество продуцируется самой трепонемой.

Цитоплазматическая мембрана

Цитоплазматическая мембрана бактерий выполняет ряд жизненно важных функций: транспортную, защитную, является местом локализации антигенов и ферментов, она принимает активное участие в делении клетки, L-трансформации и спорообразовании. Цитоплазматическая мембрана имеет трехслойное строение. Ее внутренний слой образует в протоплазматическом цилиндре многочисленные выросты, за счет чего осуществляется активный перенос извне питательных веществ. От состояния цитоплазматической мембраны зависит жизнедеятельность бактерий.

Протоплазматический цилиндр

Протоплазматический цилиндр находится под наружной стенкой. Структура цитоплазмы бледных трепонем мелкогранулярная. В прозрачную гиалоплазму погружены гранулы-рибосомы и множество пластинчатых структур. Рибосомы обеспечивают синтез белка в бактериальной клетке. В цитоплазме также присутствует нуклеотид, не имеющий ограничительной мембраны. Он тянется по всей длине протоплазматического цилиндра.

Мезосомы

Мезосомы являются производными цитоплазматической мембраны. Они занимают половину или целую ось поперечника трепонемы. Мезосомы снабжают энергией бактериальную клетку в точках усиленного роста при спорообразовании и делении. Их функция аналогична митохондриям. Мезосомы различаются по характеру строения, но количество их всегда очень большое.

Рис. 7. Ультраструктура бледной трепонемы. Мукопротеидный чехол сверху, далее трехслойная клеточная стенка, внутри — цитоплазматическая мембрана и цилиндр с нуклеотидом, мезосомами, рибосомами и другими включениями. На фото хорошо просматриваются фибриллы, идущие вдоль тела бактерии.

Размножение бледных трепонем

Размножение возбудителей сифилиса происходит путем поперечного деления. Деление бактериальной клетки длится около 33 часов и происходит только при температуре около 37 °C. Иногда бледные трепонемы делятся сразу на несколько частей.

Рис. 8. На фото бледные трепонемы.

Формы существования возбудителей сифилиса

В неблагоприятных условиях (воздействие антибиотиков, антител, физических и химических факторов окружающей среды, истощение питательной среды) бактерии трансформируются в L-формы, распадаются на зерна, образуют цисты и кокковые формы. В таких формах трепонемы могут длительно существовать в организме больного, а потом реверсировать, обуславливая рецидив сифилиса.

Бледные трепонемы в L-форме способны проникать в организм человека даже при отсутствии повреждений на коже и слизистых оболочках, проходят через фильтры, которые применяются при обработке кожи.

При заражении цист-формами бактерий отмечается удлинение инкубационного периода, возникновение скрытых форм заболевания и развитие устойчивости к антибактериальным препаратам.

Цисты

Неблагоприятные условия существования приводят к тому, что бледная трепонема превращается в цисту. Она сворачивается в клубок, а вокруг образуется бесструктурная прозрачная оболочка (чехол), состоящий иногда из нескольких слоев. Все морфологические элементы возбудителя при этом сохраняются. Существование цист покоя объясняет существование скрытых форм заболевания, длительное и вялое течение, устойчивость к антибактериальным препаратам. По мере давности заболевания количество цист увеличивается. Исследователями доказано, что цистообразование — это защитная реакция, обеспечивающая выживание и размножение возбудителей сифилиса.

L-формы

В L-формы трепонемы превращаются под воздействием целого ряда факторов. Трепонемы приобретают шаровидную форму, из-за блокировки синтеза истончается клеточная стенка, приостанавливается размножение, но сохраняется рост и интенсивность синтеза ДНК. В цитоплазме L-форм бактерий определяется гигантский нуклеотид, внутри которого находится большое количество нитей, содержащих ДНК.

Спиралевидные формы бледных трепонем преобладают на ранних стадиях сифилиса. В этот период бактерии располагаются внеклеточно, интенсивно делятся, что делает их уязвимым к действию антибиотиков.
Во вторичном периоде рецидивного сифилиса трепонемы располагаются не только внеклеточно, но и внутри фагоцитов, обнаруживается большое количество цист, более устойчивых к лечению.
На поздних стадиях заболевания отмечается значительное снижение спиралевидных форм трепонем, увеличение числа цист и L-форм. Общее количество возбудителей снижено. Реакция организма ослаблена.

Рис. 9. Хорошо просматриваются бактерии в мазках, приготовленных методом импрегнации серебром (методика Левадити).

Бледные трепонемы под микроскопом

В цитоплазме возбудителей сифилиса находится большое количество гидрофобных компонентов, из-за чего они плохо прокрашиваются анилиновыми красителями. По методу Романовского-Гимзы бактерии окрашиваются в бледно-розовый цвет, за что получили название «бледные трепонемы».

Хорошо просматриваются трепонемы с помощью фазово-контрастной (темнопольной) микроскопии. В свежеприготовленном мазке с живыми возбудителями в темном поле видны плавно изгибающиеся спиралевидные бактерии. От сапрофитных спирохет, которые встречаются в полости рта и на слизистых оболочках половых органов, бледные трепонемы отличаются равномерностью завитков, они более тонкие, осуществляют плавные волнообразные движения и способны сгибаться под углом.
Хорошо просматриваются бактерии в мазках, приготовленных методом импрегнации серебром (методика Левадити). Трепонемы окрашиваются в черный цвет и хорошо видны на фоне окрашенных в желтый цвет клеток исследуемых тканей. Серебро осаждается на бактериальных клетках, увеличивая их диаметр.
Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции. Бактерии в мазке, обработанные люминесцирующей сывороткой, светятся в ультрафиолетовых лучах люминесцентного микроскопа.

Рис. 10. На фото бледные трепонемы под микроскопом: импрегнация серебром (фото слева), микроскопия в темном поле (фото посередине), реакция иммунофлюоресценции (фото справа).

Культуральные свойства возбудителей сифилиса

Бледные трепонемы являются облигатными анаэробами — живут и растут в условиях отсутствия молекулярного кислорода. Бактерии практически не растут на искусственных питательных средах. Для их выращивания используются среды, содержащие лошадиную и кроличью сыворотки, на которых бледные трепонемы растут медленно и теряют вирулентные свойства. Рост происходит при температуре 35 0 С. Колонии возбудителей сифилиса появляются на 3 — 5 (на некоторых средах на 7 — 9) сутки.

Рис. 11. На фото рост колоний бледных трепонем.

Биохимические свойства бледных трепонем

Биохимические свойства возбудителей сифилиса изучены мало. Ряд штаммов продуцируют сероводород и индол. Некоторые штаммы разжижают желатин, другие — глюкозу, сахарозу, галактозу и мальтозу с образованием кислоты. Некоторые штаммы разлагают только глюкозу. Несколько штаммов возбудителей подвергают гемолизу эритроциты человека.

Рис. 12. На фото бледные трепонемы. Вид в электронном микроскопе.

Сифилис — хроническое венерическое заболевание, характеризующееся последовательной сменой отдельных периодов болезни. Возбудитель сифилиса был. открыт в 1905 г. немецким ученым Шаудином.

Морфология и биологические свойства. Treponema pallidum представляет собой тонкую извитую нить размером 15x0,25—0,5 мкм, имеющую 8—14 равномерных витков спирали, расположенных близко друг к другу. С трудом окрашивается анилиновыми красками и поэтому получила название бледной спирохеты. Для окраски используют метод Романовского — Гимзы (спирохеты окрашиваются в бледно-розовый цвет), негативное окрашивание раствором туши (спирохеты остаются неокрашенными и видны на темном фоне). Для выявления спирохет в инфицированных тканях используют метод импрегнации серебром (метод Левадити), при котором трепонемы, окрашенные в черный цвет, видны на фоне желтых клеток ткани. При исследовании материала в темном поле зрения бледная спирохета отличается от сапрофитных спирохет, встречающихся на слизистых оболочках полости рта и половых органов, равномерными завитками, плавными волнообразными движениями.

Она тоньше других трепонем, способна сгибаться под углом и совершать характерные маятникообразные движения. Культивируется возбудитель сифилиса с трудом, в анаэробных условиях. Для выращивания используют среды, содержащие кроличью или лошадиную сыворотку (среды Уленгута и Терских). При этом культуральные (полученные на питательных средах) штаммы спирохет теряют вирулентность и изменяют антигенную структуру. Трепонемы содержат эндотоксин, имеют сложное антигенное строение.

Устойчивость. Бледная спирохета вне тканей больного быстро погибает, неустойчива при высушивании, действии обычных дезинфицирующих веществ и высокой температуры; даже при 40°С погибает через 2 ч. К низким температурам более устойчива: выдерживает замораживание до года.

Патогенность. В естественных условиях животные сифилисом не болеют. Экспериментально удается заразить обезьян, кроликов, хомяков.

Патогенез и клиника. Входными воротами инфекции являются слизистые оболочки и кожа, имеющие самые незначительные повреждения. Инкубационный период продолжается в среднем 3—4 нед, после чего наступает первичный период сифилиса: на месте внедрения возбудителя появляется небольшая эрозия, приподнятая над кожей, с ровными краями, гладким блестящим дном, розового или красного цвета, часто безболезненная, с плотным инфильтратом у основания, из-за которого она и получила название «твердый шанкр». Возникают недомогание, головная боль. Лимфатические узлы увеличиваются, становятся плотными без видимых признаков воспаления. Они, как правило, не спаяны с окружающими тканями. Через 20—30 дней твердый шанкр заживает.

Спирохеты из лимфатических узлов проникают в кровь, размножаются и заносятся в органы и ткани и могут вызвать их поражения. Через 6—7 нед от начала заболевания развивается вторичный период сифилиса, характеризующийся генерализацией процесса и появлением обильных и разнообразных высыпаний на коже и слизистых оболочках (сифилиды) розовых или красных тонов, Сифилиды могут возникать в виде розеол, папул, везикул, пустул. Если лечение не проводится, то через 2— 3 года наступает третий период сифилиса — гуммозный. Возникает бугорковый сифилид, или глубокий узловой сифилид (подкожная гумма). На коже и слизистых оболочках появляются плотные шаровидные бугорки. Они могут существовать неопределенно долгое время, а затем рассасываются или изъязвляются с последующим образованием рубца. При образовании сифилитической гуммы в подкожной жировой клетчатке появляется узел, который увеличивается, спаивается с окружающей клетчаткой и с кожей. Над центральной частью гуммы кожа истончается и она вскрывается. Гумма превращается в гуммозную язву с неприятным запахом: дно ее покрыто некротическим распадом. В течение нескольких месяцев язва заживает и на ее месте остается втянутый звездчатый рубец. В последнем, четвертом, парасифилитическом периоде, который может наступить через 10—20 лет после начала заболевания, наблюдаются специфические поражения центральной нервной системы в форме прогрессивного паралича или спинной сухотки.

Иммунитет. Естественный, врожденный, иммунитет отсутствует: заражение всегда приводит к развитию заболевания. Вопрос о состоянии приобретенного иммунитета до конца не изучен. Во время болезни вырабатывается не¬стерильный иммунитет, носящий характер клеточного, тканевого. Его называют противошанкерным, так как при повторном заражении во время болезни новый шанкр не появляется, а спирохеты распространяются по всему организму, принимая участие в развитии последующих сифилитических поражений.

Микробиологическая диагностика. Основные методы лабораторной диагностики — микроскопический и серо-логический. В первый период проводят микроскопию серозного содержимого твердого шанкра в темном поле или в мазках, окрашенных по Романовскому — Гимзе. Микроскопическому исследованию подвергают также отделяемое кожных поражений вторичного и третичного периодов. Начиная с 5—6-й недели от момента заражения или на 2—3-й неделе после появления твердого шанкра используют серологические методы диагностики. Применяют РСК (реакцию Вассермана) и осадочные реакции (реакции преципитации) Кана и Закса — Витебского. Реакцию Вассермана ставят с сывороткой больного, используя неспецифические антигены (спиртовой экстракт липоидов из бычьего сердца с добавлением холестерина, или кардиолипиновый антиген), так как оказалось, что глобулины сыворотки больного сифилисом способны соединяться липоидными вытяжками, полученными из различных органов. Наряду с неспедифическими используют специфический антиген, полученный из ткани яичка кролика, зараженного бледной трепонемой. При отсутствии гемолиза реакцию считают положительной, так как очевидно, что комплемент связался со специфической системой антиген — антитело. Осадочные реакции просты по технике постановки. Суть их заключается в том, что при добавлении к сыворотке больного концентрированного липоидного антигена появляются помутнение, а затем и осадок. Ввиду того что антигены в этих реакциях неспецифичны, они могут быть положительны и при других инфекционных заболеваниях (туберкулез, малярия и др.).

Наиболее специфичной в серологической диагностике сифилиса является реакция иммобилизации трепонем (РИТ). Эта реакция основана на том, что при добавлении сыворотки больного сифилисом к тканевой культуре трепонем (культивируемых в яичнике кролика) они в присутствии комплемента теряют подвижность. Наряду с этой реакцией используется также непрямая РИф. Основными компонентами для постановки этой реакции являются: сыворотка больного (разведенная 1:200), тканевый штамм бледной спирохеты, антивидовая флюоресцирующая сыворотка против глобулинов человека.

Единственным источником инфекции является человек во все периоды болезни. Путь передачи — непосредственный контакт с больным (чаще всего при половом сношении), реже—через предметы обихода. Возможна передача инфекции новорожденному через плаценту от больной матери.

Профилактика и лечение. В СССР перед врачами поставлена задача ликвидации сифилиса. Для этого имеются все предпосылки: непрерывный рост благосостояния и культурного уровня жизни трудящихся, а также такие меры борьбы, как привлечение к обследованию и лечению лиц, являющихся источником заражения, и контактировавших с ними, массовые профилактические осмотры, диспансерные методы работы. Существенную роль в профилактике играют раннее выявление источников инфекции, своевременное лечение, ликвидация беспорядочных половых связей. Специфическая профилактика не проводится.

Для лечения применяют новарсенол, препараты висмута, ртути, пенициллин.

Проводят поиск бледных трепонем в активных элементах сифилиса (эрозии, язвы, эрозированные папулы, широкие кондиломы) или путем пункции лимфатических узлов.

Опыты окрашивания бледных трепонем утратили свое практическое значение в связи с тем, что бледная трепонема плохо воспринимает анилиновые краски (откуда и название возбудителя - «бледная» трепонема). Кроме того, при окрашивании теряется очень важный дифференциально-диагностический признак бледных трепонем, позволяющий отделить их от вульгарных трепонем - это виды движения (поступательное, вращательное, волнообразное, маятникообразное, V-образное). Важной является также одинаковость размеров завитка, быстрота движения и приведенные выше виды движений. Поэтому во всех лабораториях проводят исследования бледной трепонемы в живом состоянии, используя для этого обычный световой микроскоп с темнопольным конденсором. При отсутствии такого конденсора делают затемнение кружком черной бумаги (диаметр 1,5 см), который вкладывается на нижнюю линзу развинченного конденсора так, чтобы между краями линзы и бумаги оставался свободный ободок (просвет 1,5-2 мм). Пройдя через это приспособление (конденсор), луч света принимает косое направление под острым углом в месте исследуемой капли серума, не попадает в объектив, чем достигается исследование в темном поле.

Исследование проводится под темнопольным конденсором (объектив х40, окуляр х10-15). На поверхность конденсора наносят каплю вазелинового масла или каплю воды. Сверху на предметный столик помещают препарат и рассматривают его. На темном фоне можно увидеть большое количество разных клеточных элементов и среди них - бледную трепонему , которая имеет вид светлых штопорообразных нитей. Она отличается от других трепонем характерными видами движения, равномерностью завитка. Этот способ очень простой и надежный. Только в том случае, когда видят характерные черты