Серологические исследования крови на антитела. Серологические исследования

Для того чтобы определить, какое у человека заболевание необходимо провести диагностику. Если человеку с точностью выявлено, какое у него патологическое заболевание, можно без всяких проблем вылечить его. Также можно будет избежать различных осложнений. Что такое серологическое исследование? Данный метод выявляет в организме человека антигены и антитела. То есть, производится изучение анализа, которое взято у пациента. Данным методом диагностики можно выявить у больного большинство заболевание, а также держать под контролем медикаментозную терапию.

Необходимость исследования

Данный метод обследования человека распространено, которое используется по всему миру. Для выявления в сыворотке крови различных идиопатических клеток, которые возникают в теле человека, из-за проникновения вирусов и инфекции. Исследование изосерологического характера применяется для определения у человека резуса, группы, а также иные показатели крови.

Чаще всего серологический анализ крови применяется в гинекологии. Это дает возможность диагностировать различные заболевания, которые путем полового контакта передаются. Также данный метод используется для комбинированного исследования женщин, которые скоро будут рожать. Это необходимо для исключения таких заболеваний, как:

1. Сифилис.
2. Вирус иммунодефицита.
3. Токсоплазмоз.

Серологические анализы обязательны, если будущая мать становится на учет. Если ребенок заболевает корью, краснухой, ветряной оспой, и другими инфекционными заболеваниями, то серологический метод используется для полного подтверждения диагноза. Показано данный метод, если клинические проявления не совсем ярко выражены, либо по каким-либо иным причинам диагностики.

Очень часто назначается это анализ врачами-венерологами. Метод без малейших изъянов устанавливает диагноз, или решает вопрос, человек болен или нет. Диагностируются антитела среди таких болезней, как: герпес, сифилис, уреаплазмоз, лямблиоз, хламидиоз и другие подобного характера патологии. Эффективность наблюдается также при выявлении гепатита вирусного характера, аллергические проявления, энцефалит, коклюш, дифтерия, бруцеллез. Назначает этот специфический анализ врач-терапевт.

Важнейшую нишу занимает серологические реакции, которые решают госпитализировать человека в отделение, или нет.

Исследование с точностью определяет, на каком этапе развития находится какой-либо патологический процесс, а также указывает эффективность уже назначенного лечения.

Чтобы провести серологическую диагностику можно использовать различные материалы биологического характера. Это может быть как слюна больного, так и кал. Но в большинстве берется кровь человека из вены. Проводится забор крови исключительно в условиях лаборатории. Обязательным для пациента является рекомендация врача для проведения этой манипуляции.

Как нужно подготовиться?

Проведения серологического исследования проводится как в поликлинических условиях, так и в частных лабораториях. Рекомендуется сдавать этот анализ в том месте, где самое новое оборудование. Также рекомендовано прислушиваться отзывов от людей, которые уже сдавали свои анализы. За отдельную плату, забор биологического материала можно произвести в домашних условиях, в результате исключительных обстоятельств.

Существует несколько правил, которые надо учитывать, перед тем как сдавать кровь из вены. Ни в коем случае нельзя кушать, перед сдачей анализа. Исключительно на голодный желудок. Человек должен быть в полном спокойствие. За несколько дней до сдачи материала, исключается прохождения иных методов исследования (рентген, узи, кт, мрт). Также нужно после разрешения доктора отменить препараты, которые принимались изначально, для взятия анализа. Что касается других правил, которые нужно соблюдать, они назначаются врачом. Ведь для каждого недуга есть свои запреты. Например, если у человека подозревают гепатит, то за несколько дней нужно исключить прием жирной пищи и спиртных напитков.

РИФ (реакция флюоресценции)

Существует несколько подвидов серологического метода. Одним из них является реакция флюоресценции. Довольно неплохой и достаточно информативный метод. Применяется реагент, который сразу показывает антитела в исследуемой крови. Заметны эти антитела благодаря подсвечиванию. Данная реакция является самой быстрой, из всех методов исследования.

Также есть еще способ, он называется РНИФ. Его проводят в два этапа. Сначала применяются метки, которые не являются флюоресцирующими. После применяют меченые антитела для нахождения комплекса. Свечения наблюдается только тогда, когда происходит связь антиген-антитело. Что наблюдать этот процесс, ученые используют специальный прибор, который выявляет размеры и строение. Информативность данного способа достигает 96%.

ИФА (иммуноферментный анализ)

Используются специальные реагенты, которые необходимы для проведения иммуноферментного анализа. Специфические реагенты прикрепляются к искомому антителу. Вследствие этого этот метод дает возможность точно определить и подсчитать искомые комплексы. Если никаких маркеров нет, то реакция прошла отрицательно.

Данный серологический метод дает возможность объективно подсчитать искомые клетки. Тем самым диагностируется заболевание, которое может находиться в стадии разгара, или же переходить в стадию хронического течения. Также для комплексной постановки диагноза необходимо учитывать также клинические проявления.

Специфика исследований

Серологические анализы имеют широкую распространенность практически во всех странах планеты. Обширное применение происходит из-за информативности исследования. Отличный метод для выявления каких-либо заболеваний, который используется как окончательный этап диагностики. Особо хорошо себя проявил при выявлении различных заболеваний вирусного или инфекционного происхождения. Применение серологического метода широко используется для предупреждения различных эпидемий и пандемий.

Очень большое влияние на это анализ имеет человек. Если человек халатно относится к элементарным правилам тщательной подготовки к серологическому методу, то можно исказить результаты. Также ошибку может допустить сотрудник лаборатории, который неправильно подсчитал составляющие биологического материала. Доля вышеперечисленных изъянов составляет около 3-5%. Опытный доктор может заметить данную ошибку и направить больного на повторную сдачу анализов.

Как было сказано выше, то серологический метод исследования дает возможность выявить особо тяжкие заболевания, такие как гепатит, вирус иммунодефицита, а также все заболевания, которые передаются через половой контакт.

Данное направление в сфере медицины дает возможность изучать плазму крови и все свойства. Что касается стоимости проведения анализа, то он весьма невысок. Поэтому можно без особых проблем произвести это исследование. Качество серологического исследования гарантируется за счет новейших аппаратов, которые практически не допускают ошибок.

СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ (лат. serum сыворотка + греч. logos учение) - методы иммунологии, изучающие специфические свойства крови человека или животных с целью выявления антигенов или антител с помощью серологических реакций.

Начало С. и. положено в конце прошлого столетия, после того как было установлено, что соединение антигена с антителом (см. Антиген - антитело реакция) сопровождается рядом доступных визуальному наблюдению феноменов - агглютинацией (см.), преципитацией (см.) или лизисом. Появилась возможность специфического распознавания антигенов (см.) или антител (см.), если один из этих компонентов известен.

В 1897 г. Ф. Видаль сообщил, что сыворотка крови больных брюшным тифом избирательно агглютинирует брюшнотифозные бактерии и поэтому эта реакция (см. Видаля реакция) может быть применена для лаб. диагностики брюшного тифа. В том же году было показано, что фильтраты культур чумных, брюшнотифозных и холерных бактерий при соединении с соответствующими иммунными сыворотками образуют хлопья, или преципитат.

Реакция преципитации оказалась пригодной для обнаружения любых белковых антигенов. В 1900-1901 гг. К. Ландштейнер нашел, что в эритроцитах людей имеются два различных антигена (А и В), а в сыворотках крови два агглютинина (а и Р), что способствовало применению реакции гемагглютинации для определения групп крови (см.).

Реакция агглютинации для определения группы крови и резус-фактора применяется в акушерской практике, при гемотрансфузиях и трансплантации тканей. Антитела против резус-фактора (см.) представляют собой неполные антитела, они не способны к прямой реакции с резус-положительными эритроцитами, поэтому для их обнаружения используют реакцию Кумбса (см. Кумбса реакция), основанную на выявлении неполных антител с помощью антиглобулиновых сывороток. К эритроцитам известной специфичности добавляют исследуемую сыворотку крови, а вслед за этим антиглобулиновую сыворотку против IgG (непрямая реакция Кумбса). Fab-фрагменты неполных антител исследуемой сыворотки крови присоединяются к эритроцитам, а к свободным Fc-фрагментам этих антител присоединяются антитела против IgG, и происходит агглютинация эритроцитов. Для диагностики гемолитической анемии используют прямую реакцию Кумбса, В организме таких больных эритроциты соединяются с циркулирующими в крови антителами против резус-фактора. Чтобы их выявить, к эритроцитам, взятым у больного, добавляют антитела против IgG. Появление агглютинации эритроцитов подтверждает диагноз болезни.

Реакция торможения гемагглютинации - РТГА (см. Гемагглютинация) - основана на феномене предотвращения (торможении) иммунной сывороткой гемагглютинации эритроцитов вирусами. Феномен вирусной гемагглютинации не является серол. реакцией и происходит в результате соединения вируса с рецепторами эритроцитов, однако РТГА представляет собой серологическую реакцию, используемую для выявления и титрования противовирусных антител. РТГА - основной метод серодиагностики гриппа, кори, краснухи, эпидемического паротита, клещевого энцефалита и других вирусных инфекций, возбудители к-рых обладают гемагглютинирующими свойствами.

Реакция пассивной, или непрямой, гемагглютинаций, В ней используют эритроциты или нейтральные синтетические хчатериалы (напр., частицы латекса), на поверхности к-рых сорбированы антигены (бактериальные, вирусные, тканевые) или антитела (см. Бойдена реакция). Агглютинация их происходит при добавлении соответствующих сывороток или антигенов. Эритроциты, сенсибилизированные антигенами, называют антигенным эритроцитарным диагностикумом и используют для выявления и титрования антител. Эритроциты, сенсибилизированные антителами, называют иммуноглобулиновыми эритроцитарными диагностикумами (см.) и используют для выявления антигенов:

Реакция пассивной гемагглютинации применяется для диагностики заболеваний, вызванных бактериями (брюшной тиф и паратифы, дизентерия, бруцеллез, чума, холера и др.), простейшими (малярия) и вирусами (грипп, аденовирусные инфекции, клещевой энцефалит, крымская геморрагическая лихорадка и др.). Реакция пассивной гемагглютинации по чувствительности не уступает методу выделения вируса при ареновирусных болезнях (см.), в частности при лимфоцитарном хориоменингите. Вирусный антиген лимфоцитарного хориоменингита выявляется у вирусоносителей (домовых мышей) в реакции пассивной гемагглютинации с суспензиями извлеченных органов, разведенными в десятки тысяч раз. При сальмонеллезе в реакции пассивной гемагглютинации определяются бактерии при концентрации до нескольких сотен микробных тел в 1 г фекалий, дизентерийные бактерии в пищевых продуктах выявляются при содержании в 1 г материала не менее 500 микробных тел.

Реакция пассивной гемагглютинации используется в диагностике и профилактике вирусного гепатита В. В Советском Союзе для выявления HBs-антигена (см. Австралийский антиген) в крови больных с острым гепатитом В производится диагностикум, представляющий собой эритроциты кур, сенсибилизированные козьим иммуноглобулином против HBs-антигена. Каплю диагностикума соединяют с равным объемом сыворотки крови обследуемых людей, и, если в ней присутствует HBs-антиген, происходит агглютинация. Реакция способна уловить до 1,5 нг/мл HBs-антигена. Для обнаружения HBs-антител используют эритроциты с сорбированным на них HBs-антигеном, выделенным из крови больных. Реакцию пассивной гемагглютинации применяют также для выявления повышенной чувствительности больного к лекарственным препаратам и гормонам, напр, пенициллину или инсулину. В этом случае эритроциты 0 группы крови человека сенсибилизируют лекарственным веществом и затем используют для выявления к нему агглютининов в сыворотке крови больного.

Реакцию пассивной гемагглютинации используют для выявления гонадотропного гормона в моче с целью установления беременности (см. Хорионический гонадотропин). Для этого стандартная сыворотка к этому гормону инкубируется с исследуемой мочой. При последующем добавлении эритроцитов с сорбированным на них гормоном агглютинация не наступает (положительный ответ), т. к. содержащийся в моче гормон нейтрализовал агглютинирующие антитела.

Реакции, основанные на феномене преципитации

Их используют для определения самых разнообразных антигенов и антител. Простейшим примером качественной реакции является образование непрозрачной полосы преципитации на границе наслоения антигена на антитело в пробирке. Широко применяются различные разновидности реакции преципитации в полужидких гелях агара или агарозы (метод двойной иммунодиффузии по Оухтерлоню, метод радиальной иммунодиффузии, иммуноэлектрофорез), к-рые носят одновременно качественный и количественный характер (см. Иммунодиффузия , Иммуноэлектрофорез).

Для постановки двойной иммунодиффузии наливают слой растопленного геля на стеклянную пластинку и после затвердевания вырезают лунки диаметром 1,5-3 мм. В расположенные по кругу лунки помещают исследуемые антигены, а в центральную лунку - иммунную сыворотку известной специфичности. Диффундируя навстречу друг другу, гомологичные сыворотки и антигены образуют преципитат. При радиальной иммунодиффузии (по методу Манчини) иммунную сыворотку вносят в агар. Антиген, помещенный в лунки, диффундирует через агар, и в результате преципитации с иммунной сывороткой вокруг лунок образуются непрозрачные кольца, внешний диаметр к-рых пропорционален концентрации антигена. Модификацию этой реакции используют в диагностике гриппа для распознавания IgM- и IgG-антител (см. Иммуноглобулины). В агар вносят гриппозный антиген, а в лунки сыворотки крови. Затем пластины обрабатывают иммунными сыворотками против IgM- или IgG-антител, что способствует выявлению реакции соответствующих антител с антигенами. Метод позволяет одновременно определять титры антител и принадлежность их к определенному классу иммуноглобулинов.

Разновидностью иммуноэлектрофореза является радиоиммунофорез. В этом случае после электрофоретического разделения антигенов в канавку, вырезанную параллельно движению антигенов в геле, наливают сначала меченную радиоактивным йодом иммунную сыворотку против определяемых антигенов, а затем иммунную сыворотку против IgG-антител, к-рая преципитирует образовавшиеся комплексы антитела с антигеном. Все несвязавшиеся реагенты вымывают, а комплекс антиген - антитело обнаруживают методом авторадиографии (см.).

Реакции с участием комплемента. Реакции с участием комплемента (см.) основаны на способности субкомпонента комплемента Cl(Clq) и затем других компонентов комплемента присоединяться к иммунным комплексам.

Реакция связывания комплемента позволяет титровать антигены или антитела по степени фиксации комплемента комплексом антиген - антитело. Эта реакция состоит из двух фаз: взаимодействия антигена с испытуемой сывороткой крови (исследуемая система) и взаимодействия гемолитической сыворотки с бараньими эритроцитами (индикаторная система). При положительной реакции в исследуемой системе происходит связывание комплемента, и тогда при добавлении сенсибилизированных антителами эритроцитов не наблюдается гемолиза (см. Реакция связывания комплемента). Реакция широко применяется для серодиагностики висцерального сифилиса (см. Вассермана реакция) и вирусных инфекций (см. Вирусологические исследования).

Цитолиз. Антитела против клеточных структур могут при участии комплемента растворять клетки, несущие эти структуры. Лизис эритроцитов легко оценивать по степени и интенсивности освобождения гемоглобина. Лизис нуклеарных клеток оценивают путем подсчета процента мертвых клеток, к-рые не окрашиваются метиленовым синим. Часто также используют радиоактивный хром, к-рый предварительно химически связывают с клетками. Число разрушенных клеток определяют по количеству несвязанного хрома, освобождающегося при лизисе клеток.

Реакция радиального гемолиза эритроцитов может протекать в геле. Взвесь эритроцитов барана помещают в агарозный гель, добавив туда комплемент; в застывшем на стекле слое делают лунки и вносят в них гемолитическую сыворотку. Вокруг лунок в результате радиальной диффузии антител будет образовываться зона гемолиза. Радиус зоны гемолиза прямо пропорционален титру сыворотки. Если сорбировать на эритроцитах какой-либо антиген, напр, гликопротеиновый гемагглютинин вируса гриппа, краснухи или клещевого энцефалита, то можно воспроизвести феномен гемолиза иммунными сыворотками к этим вирусам. Реакция радиального гемолиза в геле нашла применение в диагностике вирусных инфекций благодаря простоте постановки, нечувствительности к сывороточным ингибиторам, возможности титровать сыворотки крови по диаметру зоны гемолиза, не прибегая к серийным разведениям.

Иммунное прилипание. Эритроциты, тромбоциты и другие клетки крови имеют на поверхности рецепторы к третьему компоненту комплемента (C3). Если к антигену (бактерии, вирусы и др.) добавить соответствующую иммунную сыворотку и комплемент, то образуется комплекс антиген - антитело, покрытый C3-компонентом комплемента. При смешивании с тромбоцитами благодаря C3-компоненту комплемента комплекс антиген - антитело осядет на клетках и вызовет их агглютинацию (см. Иммунное прилипание). Эта реакция применяется для определения антигенов системы HLA (см. Иммунитет трансплантационный) и при изучении ряда вирусных -инфекций (клещевой энцефалит, лихорадка денге), к-рые сопровождаются иммунопатол. процессами и циркуляцией в крови вирусных антигенов в комплексе с антителами.

Реакция нейтрализации основана на способности антител нейтрализовать нек-рые специфические функции макромолекулярных или растворимых антигенов, напр, активность ферментов, токсины бактерий, болезнетворность вирусов. В бактериологии эта реакция используется для обнаружения антистрептолизинов, антистрептокиназы и антистафилолизинов. Реакцию нейтрализации токсинов можно оценивать по биол. эффекту, так, напр., титруют антистолбнячные и антиботулинические сыворотки (см. Токсин - антитоксин реакция). Смесь токсина с антисывороткой, введенная животным, предотвращает их гибель. Различные варианты реакции нейтрализации применяют в вирусологии. При смешивании вирусов с соответствующей антисывороткой и введении этой смеси животным или в клеточные культуры патогенность вирусов нейтрализуется.

Реакции с использованием химических и физических меток

Иммунофлюоресценция, разработанная Кунсом (А. Н. Coons) в 1942 г., заключается в использовании для серол. реакций меченных флюорохромом сывороток (см. Иммунофлюоресценция). Меченная флюорохромом сыворотка образует с антигеном комплекс антиген - антитело, к-рый становится доступным наблюдению под микроскопом в ультрафиолетовых лучах, возбуждающих свечение флюорохрома. Реакцию прямой иммунофлюоресценции используют для изучения клеточных антигенов, выявления вируса в зараженных клетках и обнаружения бактерий и риккетсий в мазках. Так, для диагностики бешенства отпечатки кусочков мозга животных, подозреваемых на вирусоносительство, обрабатывают люминесцирующей антирабической сывороткой. При положительном результате в протоплазме нервных клеток наблюдаются глыбки ярко-зеленого цвета. На обнаружении антигенов вирусов в клетках отпечатков со слизистой оболочки носа основана экспресс-диагностика гриппа, парагриппа и аденовирусной инфекции.

Более широко применяется метод непрямой иммунофлюоресценции, основанный на выявлении комплекса антиген - антитело с помощью люминесцирующей иммунной сыворотки против IgG-антител и используемый для обнаружения не только антигенов, но и титрования антител. Метод нашел применение в серодиагностике герпеса, цитомегалип, лихорадки Ласса. В лаборатории должен храниться при г°-20° запас препаратов антигенсодержащих клеток, напр, выращенные на кусочках тонкого стекла и зараженные вирусом клетки VERO или куриные фибробласты, зафиксированные ацетоном. На препараты наслаивают исследуемую сыворотку крови, помещают препарат в термостат при f 37° для образования иммунных комплексов, а затем после отмывания несвязавшихся реагентов выявляют эти комплексы меченой люминесцирующей сывороткой против глобулинов человека. Применяя меченые иммунные сыворотки против IgM-или IgG-антител, можно дифференцировать тип антител и обнаруживать ранний иммунный ответ по наличию IgM-антител.

В энзим - иммунологическом методе применяют антитела, конъюгированные с ферментами, гл. обр. пероксидазой хрена или щелочной фосфатазой. Чтобы обнаружить соединение меченой сыворотки с антигеном, добавляют субстрат, разлагающийся присоединенным к сыворотке ферментом с появлением окрашивания в желто-коричневый (пероксидаза) или желто-зеленый (фосфатаза) цвет. Используют также ферменты, разлагающие не только хромогенный, но и люмогенный субстрат. В этом случае при положительной реакции появляется свечение. Подобно иммунофлюоресценции, энзимиммунологический метод применяют для обнаружения антигенов в клетках или титрования антител на антигенсодержащих клетках.

Наиболее популярной разновидностью энзим-иммунологического метода является иммуносорбция. На твердом носителе, к-рым могут быть целлюлоза, полиакриламид, декстран и различные пластмассы, сорбируют антиген. Чаще носителем служит поверхность лунок микропанелей. В лунки с сорбированным антигеном вносят исследуемую сыворотку крови, затем меченную ферментом антисыворотку и субстрат. Положительные результаты учитывают по изменению цвета жидкой среды. Для обнаружения антигенов на носитель сорбируют антитела, затем вносят в лунки исследуемый материал и проявляют реакцию меченной ферментом антимикробной сывороткой.

Радиоиммунологический метод основан на применении радиоизотопной метки антигенов или антител. Первоначально он был разработан как специфический метод измерения уровня циркулирующих в крови гормонов. Тест-системой являлся меченный изотопом гормон (антиген) и антисыворотка к нему. Если к такой антисыворотке добавить материал, содержащий искомый гормон, то он свяжет часть антител, при последующем внесении меченого титрованного гормона с антителами свяжется уменьшенное по сравнению с контролем его количество. Результат оценивают по сопоставлению кривых связанной и несвязанной радиоактивной метки. Эта разновидность метода носит название конкурентной реакции. Существуют и другие модификации радиоиммунологического метода. Радиоиммунологический метод - наиболее чувствительный метод определения антигенов и антител, используемый для определения гормонов, лекарственных веществ и антибиотиков, для диагностики бактериальных, вирусных, риккетсиозных, протозойных заболеваний, исследования белков крови, тканевых антигенов.

Сравнительная характеристика и использование методов серологических исследований в медицинской практике

Методы С. и. непрерывно совершенствуются в направлении повышения чувствительности и универсальности использования. Изначально серол. диагностика основывалась на выявлении антител. С появлением в середине 20 в. реакций иммунофлюоресценции и пассивной гемагглютинации, обладающих большей чувствительностью, появилась возможность обнаруживать не только антитела, но и антиген непосредственно в материале от больных. Энзим-иммунологический и радиоиммунологический методы, по чувствительности на 2-3 порядка превышающие иммунофлюоресценцию и пассивную гемагглютинацию, приближаются к методам биол. обнаружения бактерий и вирусов. Область их применения для обнаружения как антигенов, так и антител теоретически не ограничена.

Серодиагностика инф. болезней базируется на появлении антител к выделенному или предполагаемому возбудителю независимо от того, был ли обнаружен возбудитель в острой стадии болезни. Исследуют пары сывороток крови, взятых в начале болезни и 2-3 нед. спустя. Прирост антител во второй сыворотке крови не менее чем в 4 раза по сравнению с первой является диагностически значимым. Имеет также значение, каким классом иммуноглобулинов представлены антитела. IgM-антитела обнаруживают в конце острого периода болезни и в ранней стадии реконвалесценции. IgG-антитела появляются в более поздние сроки реконвалесценции и циркулируют долго. Если у женщины в первом триместре беременности обнаруживают IgM-антитела к вирусу краснухи, то это служит основанием для прерывания беременности, т. к. в этот период плод особенно чувствителен к вирусу. При разных инф. болезнях избирательно используют наиболее специфические и удобные в исполнении методы.

С. и. широко применяют в эпидемиологии. Систематический сбор и исследование образцов крови различных групп населения позволяют уяснить контакты населения с источником возбудителей инф. болезней. Изучение уровня коллективного иммунитета позволяет выявлять группы повышенного риска и планировать прививочные мероприятия, изучать географическое распространение инфекций. С. и. различных возрастных групп населения позволили, напр., ретроспективно выявить циркуляцию разных вариантов вируса гриппа в определенные периоды времени.

С. и. имеют большое значение в изучении наследственных болезней (см.) и аутоиммунных болезней, сопровождающихся появлением ткане- и органоспецифических антител, разрушающих соответствующие клетки-мишени, а также в онкологии для обнаружения опухолевых антигенов. Так, иммунодиагностика рака печени основана на определении в сыворотке крови больных альфа-фетопротеина и других эмбриональных антигенов методом иммунодиффузии и радиоиммунологическим методом.

Значительный прогресс науки в изучении тонкой антигенной структуры клеточных антигенов, антигенов бактерий и вирусов достигается благодаря применению в серол. реакциях моноклональных антител, к-рые можно получать к отдельным детерминантам антигена.

Библиография: Методы исследований в иммунологии, под ред. И. Лефковитса и Б. Перниса, пер. с англ., М., 1981; Руководство по иммунологии, под ред. О. Е. Вязова и Ш. X. Ходжаева, М., 1973; Руководство по клинической лабораторной диагностике, под ред. В. В. Меньшикова, М., 1982; Immunology, ed. by J.-F. Bach, N. Y., 1978.

С. Я. Гайдамович.

В каких случаях используется серологический анализ крови

Серология представляет собой науку, которая позволяет качественная изучить свойства сыворотки человеческой крови. Это один из важнейших разделов иммунологии, который уделяет особенное внимание взаимодействию антигенов и антител.

Существует две основные разновидности серологической реакции по способу действия:

1. Прямая. Также имеет название двухкомпонентная. К данному типу относятся реакции агглютинации, а также пассивной гемагглютинации.
2. Косвенная, или трехкомпонентная. Происходит торможение гемагглютинации или реакции нейтрализации.

На данный момент этот вид исследований активно применяется в следующих целях:

1. Определение группы крови человека.
2. Выявление числа антител, которые возникли в результате появления инфекционного возбудителя в организме человека. В этом случае необходимо провести комплексную оценку химической реакции, которая появилась из-за добавления в сыворотку специального антигена болезни.
3. Определение инфекционного заболевания по антигенам, при этом в кровь необходимо добавить антитела для эффективного проявления антигена.

Если в процессе свертываемости возникли какие-либо проблемы, в таком случае следует срочно принять соответствующие меры. В противном случае бездействие может привести к инфарктам, тромбозу или инсульту.

Основные показания для выполнения серологического анализа крови

На сегодняшний день данная методика активно используется для определения следующих болезней:

• амебиаз;
• лямблиоз;
• описторхоз;
• сифилис;
• токсокароз;
• токсоплазмоз;
• трихинеллез;
• цистицеркоз;
• эхинококкоз.

Кроме того, такие исследования применяются в следующих случаях:

• обследование беременной женщины;
• выявление болезней сердечно-сосудистой системы;
• обследования, которые необходимы в венерологии и урологии;
• исследования печени;
• различные обследования перед или после выполнения операций;
• определение патологий в процессе свертываемости крови;
• варикозное расширение вен;
• аутоиммунные болезни;
• выявление эффективно проведения лечения;
• после окончания соответствующей терапии.

Таким образом, при помощи серологического исследования крови человек можно своевременно выявить различные виды сложнейших заболеваний. Это позволяет назначить эффективный план лечения.

Серологический анализ крови: плюсы и минусы

Каждый вид обследования имеет свои преимущества и недостатки, которые стоит учитывать.

К достоинствам методики можно отнести следующие аспекты:

• достоверность результата;
• доступная стоимость;
• результат готов в довольно короткие сроки – всего сутки необходимы для полной готовности;
• способ позволяет проводить контроль за качеством и эффективностью всего лечения.

Главным недостатком считается то, что определенные заболевания можно выявить не сразу, так как существует инкубационный период.

Как подготовиться к сдаче анализа

Данный анализ сдается исключительно натощак. Чтобы избежать различных ошибок и получить максимально достоверный результат, рекомендуется придерживаться следующих правил:

1. За несколько дней лучше исключить из своего рациона слишком жирные и острые блюда.
2. Постараться меньше нервничать и беспокоиться.
3. Минимизировать употребление продуктов, содержащих большое количество сахара.
4. Ограничить физические упражнения.
5. Отказаться от алкогольных напитков и никотина.

Благодаря вышеперечисленным правилам вы сможете получить максимально достоверный результат.

Расшифровка

Метод иммуноблота

Нетрепонемные реакции оцениваются в лабораторных условиях. При отрицательном результате в графе выставляется прочерк. Если были найдены хлопья достаточно крупных размеров, то показатель будет составлять от +3 до +4. Если были выявлены средние по размеру хлопья, то в результате будет указано +1 и +2.

Важно помнить, что инфицирование выявляется только по прошествии одного-двух месяцев.

Трепонемные тесты более точные. Но обозначения во многом совпадают.

Помните, что анализы индивидуальны, и только профессиональный лаборант может по-настоящему точно расшифровать их. Не стоит заниматься самостоятельным лечением, так как здоровье можно доверить только специализированным докторам.

Серологический анализ крови представляет собой фундаментальный метод исследования, осуществляемый в целях быстрого и достоверного выявления микробов, инфекций и вирусов в организме человека. Помимо этого благодаря данному методу можно определить весь перечень существующих болезней, возникших в результате понижения иммунитета.

За счет серологического анализа осуществляется изучение забранной у пациента крови на ВИЧ, сифилис и иные опасные недуги. К тому же исследование необходимо в случае утверждения группы крови пациента и для определения специфичности белков.

Как отмечалось ранее, анализ рекомендован для диагностирования инфекционных недугов и установления стадии течения воспалительного процесса. Благодаря серологической химической реакции можно определить уровень взаимодействия антигенов и антител, отвечающих за результат.

Данный анализ применяется:

1. При определении числа антител, борющихся с возбудителем заболевания: в ходе анализа сыворотку крови смешивают с антигеном возбудителя болезни, после чего смотрят на происходящую реакцию.
2. Обратная ситуация – развивающуюся инфекцию обнаруживают за счет находящихся антигенов, выявляемых путем дополнения в кровь антител.
3. В случае установления группы крови.

При плохой свертываемости крови и в случае гиперкоагуляции могут произойти опасные последствия, связанные с сердечной деятельностью.

Необходимость в серологических исследованиях возрастает, когда у пациента есть подозрения на наличие половой инфекции и других заболеваний. В полученном результате пройденного анализа есть информация о наличии в крови антител к данному типу бактерий либо вирусов. Это болезни печени, корь, вирус иммунодефицита человека, герпес и др. В случае выявления антител доктор выносит заключение пациенту и определяет дальнейший курс терапии. Если есть необходимость, нужно будет пройти дополнительные исследования.

Забор материала осуществляется из локтевой вены. Анализ берется на голодный желудок с утра. Вместе с тем перед сдачей биохимического анализа на гепатит следует исключить из ежедневного рациона все овощи и фрукты, имеющие яркую окраску. Если потребуется подтверждение результатов готового анализа, можно назначить вторичное обследование без спецподготовки.

Расшифровка серологического анализа

Данное лабораторное исследование показано пациентам при появлении трудностей дифференциальной диагностики различного рода инфекций. В данном случае только серологический анализ сможет определить тип возбудителя инфекции и помочь врачу определить диагноз заболевания. К тому же огромная польза данной методики отражается при подборе лекарственной терапии пациенту, потому что возбудители многих болезней сильно различаются своей чувствительностью к действию антибиотиков и иных лекарственных средств.

Благодаря серологическому исследованию можно без труда определить наличие у человека болезни, которая была вызвана попаданием в организм скрытой инфекции. Окончив процедуру сбора материала, лаборанты выполняют расшифровку показателей, позволяющих опытным врачам в полном объеме исследовать патологии, возникшие в организме. В случае отсутствия в крови антител у человека не развивается инфекционное заболевание. При этом результат анализа будет положительным. Но это редкий случай. Как правило, при наличии симптомов болезни серологический анализ служит доказательством наличия опасной патологии. В этом случае процесс дублируется. Изначально выявляют нахождение в организме мелких возбудителей инфекции. Далее по числу антител идентифицируют степень развития воспалительного процесса.

Нормой при осуществлении данного теста считается нулевое содержание антител. Значение всегда будет означать наличие в организме патологии. В связи с этим пациенту требуется прохождение дополнительных исследований для подтверждения поставленного диагноза.

Особенности серологического исследования на сифилис, ВИЧ и гепатит

Анализ на сифилис предусматривает обнаружение белков, отвечающих за поступление в организм человека возбудителя инфекции – трепонемы бледной. Биологическим материалом в данном случае является сыворотка крови. Перед сдачей крови за 4 дня следует прекратить прием сердечных лекарственных средств и отказаться от любой алкогольной продукции. Следует отметить, что инфицирование можно установить только по истечении 1,5-2 месяцев с момента заражения. Если данный анализ выполняет беременная женщина, она должна быть готова к ложноположительному результату.

Основанием для проведения серологического анализа на гепатит могут стать такие симптомы:

• беспричинная переутомляемость и бессилие организма;
• плохой аппетит либо его отсутствие;
• рвота;
• изменения оттенка мочи и кала;
• желтушность кожи лица.

Помимо этого диагностирование гепатита считается необходимым при прохождении профосмотра либо в период обследования при беременности.

Если у человека было определено положительное заключение анализа на ВИЧ-инфекцию, это не значит, что он инфицирован СПИДом. Если с момента заражения прошло менее 2 месяцев, присутствие в крови антител к вирусу иммунодефицита не может позволить подвести итог, свидетельствующий о развитии заболевания. Для этого необходимо повторить процедуру. Анализ на ВИЧ осуществляется в обязательном порядке при беременности в момент первого посещения и на 30 неделе срока.

Иммуноферментный анализ крови

Одной из популярных разновидностей серологических исследований считается иммуноферментный анализ, осуществляемый для эффективного контроля над числом антигенов и антител в сыворотке крови человека. К тому же с помощью данного метода возможно определение содержания гормонов, иммунологических комплексов и иных биологических компонентов.

При проникновении в ткань и жизненно важные органы человека биоорганических веществ иммунитет не допускает их влияния на здоровье за счет антител и иммуноглобулинов. В результате их воздействия в организме образуется комплекс антиген-антитело. Только его всесторонний анализ будет являться важной составляющей иммуноферментного метода.

В качестве основного материала, необходимого для выполнения исследования, выступает кровь пациента. В некоторых случаях, чтобы распознать вид заболевания или подобрать терапию, для анализа берут цереброспинальную и амниотическую жидкость. Иммуноферментный анализ крови как составляющее звено серологии основывается на детальном изучении кровяных молекул и иммуноглобулинов. Их особенностью является способность к обнаружению и уничтожению возбудителей инфекций совместно с определенным антигеном.

К преимуществам этого метода относят возможность определения болезни на ранних этапах ее развития, быстроту и точность результата, низкую стоимость и исключение подготовки к исследованию.

Недостатков метода немного: возможно получение ложноотрицательного результата, что требует в дальнейшем повторного тестирования.

Перед тем как сдавать какой-либо лабораторный анализ, необходимо соблюдать правила подготовки. Сбор материала должен проводиться исключительно в санитарных условиях. К тому же необходимо не допустить попадания в кровь постороннего вещества. Важным условием каждого анализа на инфекции является сдача крови исключительно натощак. При этом за день до сдачи анализа не рекомендуется употреблять жирную и острую пищу, алкогольную продукцию и сладкие напитки. Дополнительно необходимо избегать стрессовых ситуаций и любых физических нагрузок. В любом случае перед тем, как принять решение о сдаче крови на исследование, нужно пройти медицинское обследование у лечащего врача.

Услышав жалобы пациента, доктор сможет порекомендовать целесообразность сдачи серологического анализа крови.

Серология – наука, изучающая сыворотку крови человека и её свойства. В современной медицине так называют один из разделов иммунологии, уделяющий основное внимание взаимодействию антител и антигенов в сыворотке крови пациента. Сами серологические реакции по своему механизму действия могут быть двух видов:

1. Двухкомпонентная или прямая реакция. Сюда относят реакцию агглютинации и пассивной гемагглютинации.
2. Трёхкомпонентная или косвенная реакция. В этом случае речь идёт о реакции нейтрализации или торможения гемагглютинации.

При их комбинации могут возникать бактериолиз, реакция связывания комплимента и т.д. Серологические реакции широко используются как в диагностической, так и в научной практике.

Определение группы крови, переливание крови и плазмы, определение специфичности белка, контроль эффективности вакцинации и выявление агента инфицирования – всё это стало возможно только благодаря серологическим реакциям.

Также к задачам серологии можно отнести изготовление различных диагностических и лечебных сывороток с постоянным контролем их воздействия на организм пациента.

Типы серологических исследований

Образование иммунных комплексов или соединение антител с антигенами носит название серологической реакции и может использоваться в диагностике заболеваний двумя путями:

1. Введение в сыворотку крови человека точно известного антигена возбудителя и по происходящей химической реакции определение антител для содержащихся в организме патологических клеток.
2. Добавление к сыворотке крови пациента определённых антител с целью выявления антигена, соответствующего конкретному микроорганизму или вирусу, вызвавшему патологический процесс в организме.

Серологический анализ крови показан больным в определённых случаях. Его применяют при возникновении затруднений при проведении дифференциальной диагностики инфекционного заболевания, когда только выявление конкретного возбудителя позволит поставить правильный диагноз пациенту. Также большая польза от этого метода сказывается при назначении медикаментозного лечения, так как возбудители различных заболеваний резко отличаются своей восприимчивостью к современным антибиотикам, сульфаниламидам и другим лекарственным препаратам.

Иммуноферментный анализ крови

Одним из основных видов серологического исследования является иммуноферментный анализ крови. Он проводится с целью контроля качественного или количественного содержания антигенов и антител в сыворотке крови пациента. Кроме этого данный метод даёт возможность определить количество гормонов, иммунологических комплексов и других биологических веществ в сыворотке.

Как было указано выше, при попадании в органы и ткани антигенов иммунная система блокирует их воздействие на организм с помощью собственных специальных белков – антител или иммуноглобулинов. Под их воздействием происходит образование комплекса антиген – антитело.

Именно его количественный и качественный анализ и является основой иммуноферментного метода.

Основным биологическим материалом этого лабораторного метода является кровь пациента, хотя исследования спинномозговой жидкости, околоплодных вод, лёгочного пунктата тоже представляют большую ценность в диагностике и лечении многих заболеваний.

Иммуноферментный анализ крови как составляющая серологического анализа основной упор делает на исследование иммунных молекул крови или иммуноглобулинов. Их специфическая особенность обнаруживать и уничтожать определённые возбудители инфекционных болезней, кооперируясь с конкретным антигеном, широко используется для проведения данного исследования.

Из известных в медицинском мире пяти типов иммуноглобулинов широкий клинический эффект получил контроль за наличием в сыворотке крови иммуноглобулинов A, M, и G. Особенно важен иммуноглобулин A, который за счёт своего присутствия на поверхности слизистых оболочек препятствует проникновению чужеродного агента в организм. Важно и то, что возможность определения типа иммуноглобулина при этом исследовании позволяет не только ставить правильный диагноз, но и прогнозировать течение болезни с большим процентом вероятности.

Анализ на ВИЧ (форма 50) призван выявить наличие антител, которые образовались в организме инфицированного - ответ на заражение вирусом иммунодефицита человека:

Преимущества и недостатки

К главным достоинствам иммуноферментного анализа крови относятся:

• Возможность выявления наличия в организме пациента патологии на ранних стадиях.
• Постоянный контроль за развития болезни.
• Быстрота и точность получаемого результата.
• Отсутствие необходимой подготовки больного к исследованию и финансовая доступность метода.

К недостаткам данного метода лабораторной диагностики можно отнести получаемый в редких случаях ложноотрицательный анализ, что влечёт за собой необходимость периодического контрольного тестирования.

Широкое применение иммуноферментный анализ крови получил при диагностике вирусных заболеваний, урогенитальных инфекций, патологии эндокринной системы, онкологии, аллергологии и многих других заболеваний. Этот метод также востребован при проведении анонимного исследования на наличие ВИЧ, сифилиса и гепатита С. Это особенно важно при наличии явно неблагоприятной эпидемиологической обстановки с этими заболеваниями в стране и в мире.

Серологический или иммуноферментный анализ на сегодняшний день является мощным и важным методом диагностики многих тяжёлых заболеваний, в том числе и социальных.

Хотелось бы надеяться, что наши медики продолжат широко использовать и усовершенствовать такой необходимый для широкого круга больных метод лабораторной диагностики.

Расшифровка серологического анализа

Серологический анализ крови позволяет выявить у пациента наличие заболевания, вызванного проникновением в организм инфекции. После его проведения врачами-лаборантами производится расшифровка полученных данных, которые позволяют клиницистам более полно судить о патологическом процессе. Опуская всю профессиональную терминологию, можно сказать, что отсутствие в крови проверяемого антител является положительным результатом и отрицает наличие у него инфекционного заболевания. Но это единичные случаи. Обычно при наличии соответствующей симптоматики серологический анализ крови является последним доводом о присутствии серьёзной патологии.