Серологическая диагностика сифилиса.

Анализ на сифилис является одним из самых распространенных среди лабораторных исследований. Широко используются анализы на сифилис при проведении профилактических обследований. При помощи микроскопии выявляется возбудитель сифилиса — . При помощи серологических реакций подтверждается диагноз сифилиса, устанавливается диагноз скрытого сифилиса, проводится контроль эффективности лечения, определяется излеченность больных.

Диагноз сифилиса устанавливается на основании клинических данных, обнаружении возбудителей сифилиса в образцах материала и подтверждении диагноза серологическими методами исследования. Проявления сифилиса многочисленны и многообразны, ввиду чего болезнь выявляется врачами разных специальностей. Дифференциальная диагностика первичного сифилиса проводится с целым рядом заболеваний.

Рис. 1. На фото первичное проявление сифилиса — твердый шанкр.

Антитела к бледной трепонеме и серологическая диагностика

При заражении сифилисом в организме больного образуются антитела. Серологическая диагностика помогает врачу изучать динамику образования антител в организме больного сифилисом в начальных стадиях заболевания, в период лечения и после его окончания, решить вопрос рецидив заболевания у больного или повторное заражение (реинфекция), поставить диагноз сифилиса при массовых медицинских условиях.

Антитела к бледной трепонеме IgM

Первыми после заражения начинают вырабатываться антитела IgM. Они начинают выявляться при помощи серологических реакций уже со второй недели после заражения. На 6 — 9 неделях заболевания их количество становится максимальным. Если больной не лечился, то антитела исчезают через полгода. Антитела IgM исчезают через 1 — 2 мес. после , через 3 — 6 мес. — после лечения позднего сифилиса. Если регистрируется их рост, то это служит или говорит о повторном заражении. Молекулы IgM крупные и через плаценту к плоду не переходят.

Антитела к бледной трепонеме IgG

Антитела иммуноглобулины IgG появляются в конце первого месяца (на 4-й неделе) от момента заражения. Их титр выше, чем титр IgM. IgG сохраняются после излечения достаточно длительное время.

Неспецифические антитела

Существует множество серологических реакций. Это объясняется антигенной множественностью бледных трепонем. В сыворотке крови больного человека на разных стадиях сифилиса кроме специфических образуются те или иные неспецифические антитела — агглютинины, комплементсвязывающие, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию, преципитины и др. Серологические реакции по выявлению неспецифических антител обладают относительной специфичностью поэтому, чтобы избежать диагностических ошибок, следует пользоваться не одним, а комплексом серологических реакций (КСР).

Ложноположительные анализы на сифилис

Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций. Антитела-реагины, которые вырабатываются в крови человека против кардиолипинового антигена, регистрируются не только при сифилисе, но и при других заболеваниях: коллагенозах, гепатитах, заболеваниях почек, тиреотоксикозе, онкозаболеваниях, при инфекционных заболеваниях (лепра, туберкулез, бруцеллез, малярия, сыпной тиф, скарлатина), при беременности и месячных циклах, при приеме жирной пищи и алкоголя. Отмечено, что с возрастом количество ложноположительных реакций возрастает.

Рис. 2. На фото первичный сифилис у женщин.

Лабораторная диагностика сифилиса с применением серологических реакций

Серологические тесты на сифилис подразделяются на трепонемные и нетрепонемные.

1. Нетрепонемные тесты

В качестве антигена в этой группе тестов используется кардиолипиновый антиген. Липидные антигены возбудителей сифилиса самые многочисленные. Они составляют 1/3 сухой массы клетки. С помощью нетрепонемных тестов выявляются антитела-реагины, которые вырабатываются против кардиолипинового антигена. В эту группу входит реакция связывания комплемента (РСКкард), реакция микропреципитации (РМП), реакция быстрого определения реагинов плазмы (RPR) и др. С помощью нетрепонемных тестов проводится первичный скрининг на сифилис (обследование групп населения), а возможность получения результатов в количественном варианте позволяет использовать эти тесты с целью контроля эффективности лечения. Положительные результаты нетрепонемных тестов должны подтверждаться трепонемными тестами. Отличительной особенностью нетрепонемных тестов является получение ложноположительных реакций.

2. Трепонемные тесты

В трепонемных тестах используются антигены трепонемного происхождения, выделенные из культуры бледных трепонем. С их помощью подтверждаются положительные результаты нетрепонемных тестов. В группу входят: РСКтреп — реакция связывания комплемента, РИФ — реакция иммунофлюоресценции и ее модификации, РИТ, РИБТ — реакция иммобилизации бледных трепонем, РПГА — реакция пассивной гемагглютинации, ИФА — иммуноферментный анализ.

3. Тесты на сифилис с использованием рекомбинантных антигенов

Антигены для данной группы тестов получают генно-инженерным путем и используют в реакциях — РПГА и ИФА, в анализах иммуноблоттинга (ИБ) и иммунохроматографическом анализе.

Рис. 3. Для диагностики сифилиса используется комплекс серологических тестов.

Диагностика сифилиса с применением нетрепонемных тестов

Для выявления сифилиса используются нетрепонемные тесты или комплекс серологических реакций (КСР). Серологическая диагностика применятся с 5-й недели от момента заражения или с 2-3 недели после появления . Антитела выявляются практически у всех больных со свежим первичным, . Серологические реакции положительные у 70 — 80% больных с , в 50 — 60% случаев у больных третичным скрытым сифилисом.

Серологические реакции с применением нетрепонемных тестов могут давать ложноположительные результаты.

Рис. 4. Забор крови для проведения анализа на сифилис.

Реакция связывания комплемента (РСК кард, КСК с КА, реакция Вассермана)

Реакция Вассермана (RW, РВ), изобретенная А. Вассерманом более 100 лет назад, сегодня претерпела множество изменений, однако, как дань традиции, сохранила свое название по настоящее время. Реакция связывания комплемента с применением кардиолипинового антигена предназначена не только для выявления антител, но и выполняется в количественном варианте — с разными разведениями сыворотки, что позволяет использовать ее для контроля эффективности лечения. Низкая чувствительность и специфичность, получение ложноположительных результатов — отрицательные стороны данного вида исследования.

Суть реакции Вассермана заключается в следующем: антигены, которые применяются при постановке реакции Вассермана, в случае наличия антител к возбудителям сифилиса в крови человека посредством комплимента связываются с ними и выпадают в осадок. Интенсивность реакции обозначают знаком (+). Реакция может быть отрицательной (-) — отсутствие осадка, сомнительной (небольшой осадок или +), слабоположительной (++), положительной (+++) и резко положительной (++++).

Более чувствительной является видоизмененная реакция Вассермана — реакция Колмера. С ее помощью выявляются антитела в сыворотках, где реакция Вассермана дала отрицательный результат.

При резко положительных реакциях проводится количественное определение реагинов, для чего используется сыворотка в разведениях от 1:10 до 1: 320, что позволяет использовать данный вид исследования для контроля эффективности лечения. Например, снижение титра антител и последующая их серонегативация (получение отрицательных результатов), говорит об успешном излечении заболевания.

Рис. 5. Анализ крови на сифилис — реакция Вассермана.

Микрореакция преципитации (МРП)

Микрореакция преципитации применяется для массовых обследований отдельных групп населения, диагностики сифилиса и контроля над эффективностью лечения. Для проведения данного вида исследования необходимо небольшого количества исследуемого материала. В основе микрореакции преципитации лежит иммунологическая реакция антиген-антитело. В случае наличия антител в сыворотке крови обследуемого комплекс антиген-антитело выпадает в осадок с образованием хлопьев. Реакция проводится в лунках специальной стеклянной пластины. Оценивается по интенсивности выпавшего осадка и величине хлопьев в (+) как реакция Вассермана. При обследовании беременных, доноров и для контроля эффективности лечения не применяется. VDRL и RPR являются разновидностями микрореакций.

Рис. 6. Вид реакции преципитации в капле на стекле.

Рис. 7. Анализ крови на сифилис — реакция микропреципитации.

Рис. 8. Набор для проведения реакции быстрого определения реагинов плазмы (Тест на сифилис RPR).

Все положительные тесты, полученные при проведении неспецифических серологических реакций, требуют подтверждения специфическими реакциями — трепонемными тестами.

Диагностика сифилиса с применением трепонемных тестов

При проведении трепонемных тестов используются антигены трепонемного происхождения. Их отрицательной стороной является невозможность использования для контроля эффективности проводимого лечения, получение положительных результатов при спирохетозах и невенерических трепонематозах и получение ложноположительных результатов при онкологических заболеваниях, лепре, некоторой эндокринной патологии. Такие тесты, как РПГА, ИФА и РИФ остаются положительными многие годы после излечения сифилиса, а в некоторых случаях и пожизненно.

РИБТ и РИФ являются более специфическими из всех серологических реакций, применяемых для диагностики сифилиса. Они позволяют различать ложноположительные реакции, выявлять поздние формы сифилиса, протекающие с отрицательными реакциями. При помощи РИБТ распознаются ложноположительные реакции у беременных, когда необходимо решить вопрос об инфицированности ребенка.

Реакция иммобилизации бледных трепонем (РИБТ, РИТ)

Суть реакции заключается в том, что антитела, находящиеся в сыворотке крови больного, обездвиживают бледные трепонемы. Отрицательной считается реакция при иммобилизации до 20% возбудителей, слабоположительная — 21 — 50%, положительная — 50 — 100%. РИБТ иногда дает ложноположительные результаты. Тест сложный и трудоемкий, однако, является незаменимым при проведении дифференциальной диагностики скрытых форм заболевания и ложноположительных результатов серологических реакций, в том числе у беременных. РИБТ дает 100% положительный результат при вторичном, раннем и позднем сифилисе, в 94 — 100% случаев — при других формах сифилиса.

Реакция иммунофлюоресценции (РИФ)

Суть реакции заключается в том, что бледные трепонемы (антигены), соединенные с антителами, меченными флюорохромами, издают в люминесцентном микроскопе желто-зеленое свечение. Результат оценивается знаком (+). С помощью РИФ выявляются иммуноглобулины класса А. Реакция иммунофлюоресценции становится положительной раньше, чем реакция Вассермана. Она всегда положительная при вторичном и латентном сифилисе, в 95 — 100% случаев положительная при третичном и врожденном сифилисе. Техника проведения данного вида исследования проще, чем у РИБТ, но заменить РИФ на РИБТ невозможно, так данная реакция уступает РИБТ по специфичности. РИФ-10 (модификация РИФ) более чувствительна, РИФ-200 и РИФ-абс более специфичны.

Рис. 9. Анализ крови на сифилис — реакция иммунофлюоресценции (РИФ).

Реакция иммунного прилипания бледных трепонем (РИПБТ)

Суть реакции заключается в том, что сенсибилизированные сывороткой больного бледные трепонемы в присутствии комплемента прилипают к поверхности эритроцитов. Полученные комплексы при цетрофугировании выпадают в осадок. Чувствительность данного теста и специфичность близки к РИФ и РИБТ.

Иммуноферментный анализ на сифилис (ИФА)

С помощью ИФА определяются иммуноглобулины класса М и G. Методика IgM – ИФА может быть использована в качестве скринингового и подтверждающего теста. Чувствительность ИФА и его специфичность аналогичны РИФ. При сифилисе ИФА дает положительные результаты с третьего месяца инфицирования и довольно долго (иногда всю жизнь) остается положительным.

Рис. 10. Иммуноферментный анализатор.

Реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (РПГА)

РПГА основана на способности эритроцитов, на которых адсорбированы антигены бледной трепонемы, в присутствии сыворотки больного склеиваться (гемагглютинация). РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса, в том числе скрытого. При применении высокого качества антигена данный вид серологической реакции превышает все остальные тесты по специфичности и чувствительности.

Рис. 11. РПГА применяется для диагностики всех форм сифилиса.

Рис. 12. Анализ на сифилис — реакция пассивной (непрямой) гемагглютинации (схема).

Рис. 13. Вид перевернутого зонтика, занимающего все дно пробирки, свидетельствует о положительной реакции. В случае, когда эритроциты оседают столбиком («пуговка») в центре дна пробирки говорят об отрицательной реакции.

Рис. 14. Тест РПГА в лабораторных условиях.

Микробиологическая диагностика

Наряду с серологической диагностикой методика обнаружения бледных трепонем (микробиологическая диагностика) играет важную роль, особенно в период серонегативного сифилиса, когда еще в крови отсутствуют антитела, но уже есть первые проявления свежего первичного сифилиса (твердый шанкр).

Биологическим материалом для исследования служит отделяемое с поверхности твердых язв (шанкров), содержимое пустулезных сифилидов, мокнущих и эрозивных папул, пунктаты инфицированных лимфатических узлов, ликвор и амниотическая жидкость, для проведения ПЦР — кровь.

Наилучшей методикой обнаружения возбудителей сифилиса является исследование биологического материала в темном поле микроскопа. Данная методика позволяет увидеть бледные трепонемы в живом состоянии изучить ее особенности строения и движения, отличить патогенные возбудители от сапрофитов.

Рис. 15. Анализ на сифилис — темнопольная микроскопия.

Рис. 16. При изучении сухих мазков используется окраска по Романовскому-Гимзе. Бледные трепонемы окрашиваются при этом в розовый цвет, все остальные виды спирохет — в фиолетовый.

Обнаружение бледных трепонем при микроскопии в темном поле — абсолютный критерий окончательной диагностики сифилиса.

Рис. 17. Для выявления бактерий применяется реакция иммунофлюоресценции (РИФ) — трепонемный тест. Специфический комплекс антиген- антитело при соединении со специфической сывороткой, меченной флюорохромом, в свете люминесцентного микроскопа дает свечение бактерий зеленоватым цветом.

Рис. 18. Возбудители сифилиса хорошо просматриваются в мазках, приготовленных по методике Левадити (импрегнация серебром). Бледные трепонемы темного цвета на фоне желтой окраски клеток инфицированных тканей.

Рис. 19. Возбудитель сифилиса при многократном увеличении.

Рис. 20. На фото колонии бледных трепонем. Получить культуру бактерий тяжело. Они практически не растут на искусственных питательных средах. На средах, содержащих лошадиную и кроличью сыворотки, колонии появляются на 3 — 9 сутки.

ПЦР на сифилис

Эффективным и перспективным сегодня является методика проведения полимеразной цепной реакции. ПЦР на сифилис позволяет получить результат в течение нескольких часов, а в собранном для диагностики материале может присутствовать хотя бы несколько возбудителей заболевания.

Рис. 21. ПЦР на сифилис позволяет обнаружить ДНК или ее фрагменты бледных трепонем.

Чувствительность данного метода исследования зависит от наличия в биологическом материале бледных трепонем и достигает 98,6%. Специфичность данного теста во многом зависит от правильного выбора мишени для амплификации при проведении диагностики и достигает 100%.

Вместе с тем, в связи с недостаточно изученной сравнительной характеристики чувствительности и специфичности прямых методов диагностики сифилиса и ПЦР, данный метод обследования в РФ для диагностики заболевания пока не разрешен.

ПЦР на сифилис разрешено проводить лишь в некоторых случаях, как дополнительный метод диагностики врожденного сифилиса, нейросифилиса, при затруднениях проведения диагностики сифилиса с использованием серологических методов исследования у ВИЧ-больных.

• Анализ крови на антитела – выявление инфекционных заболеваний (корь, гепатит, хеликобактер, туберкулез, лямблии, трепонема и др.). Анализ крови на наличие резус-антител при беременности.
• Анализ крови на антитела – виды (ИФА, РИА, иммуноблоттинг, серологические методики), норма, расшифровка результатов. Где можно сдать анализ крови на антитела? Цена исследования.
• Осмотр глазного дна – как проходит обследование, результаты (норма и патология), цена. Осмотр глазного дна у беременных женщин, детей, новорожденных. Где можно пройти обследование?
• Осмотр глазного дна – что показывает, какие структуры глаза можно обследовать, какой врач назначает? Виды осмотра глазного дна: офтальмоскопия, биомикроскопия (с линзой Гольдмана, с фундус-линзой, на щелевой лампе).
• Глюкозотолерантный тест – что он показывает и для чего нужен? Подготовка и проведение, нормы и расшифровка результатов. Глюкозотолерантный тест при беременности. Где можно купить глюкозу? Цена исследования.
• УЗИ желудка и пищевода – расшифровка результатов, показатели, норма. Что показывает УЗИ при различных заболеваниях желудка и пищевода? Где можно сделать УЗИ желудка и пищевода? Цена исследования.
• УЗИ желудка и пищевода – что показывает, какой врач назначает исследование, показания и противопоказания, подготовка и проведение. Как делают УЗИ желудка и пищевода ребенку?
• Допплерометрия при беременности – исследование кровотока и сосудов плода, плаценты, матки и маточных артерий. Показатели нормы по неделям, расшифровка результатов.

Серологическая диагностика сифилиса

Диагностика сифилиса основывается на клинических и лабораторных данных. Диагноз сифилиса ставят только после лабораторного подтверждения, т. е. обнаружения бледных трепонем в отделяемом твердого шанкра, эрозивных папул при первичном и вторичном сифилисе, и данных серологического обследования. Серологические реакции являются чрезвычайно ценным методом не только для подтверждения диагноза сифилиса, но и наблюдения за динамикой его течения под влиянием лечения и определения излеченности болезни.

Стандартные компоненты комплекса серологических реакций (КСР) для констатации сифилитической инфекции в настоящее время дополняются трепонемными реакциями: РИБТ (реакция иммобилизации бледных трепонем), РИФ (реакция иммунофлюоресценции). Реакция Вассермана (RW, РВ) основана на феномене связывания комплемента. Для ее постановки используют кардиолипиновый антиген, являющийся холестеринизированным спиртовым экстрактом из мышц бычьего сердца и обладающий сходными антигенными свойствами с бледной трепонемой.

Реакция Вассермана. Комплемент связывается комплексом (липоидный антиген и реагин испытуемой сыворотки). Для индикации образовавшегося комплекса используют гемолитическую систему (эритроциты барана и гемолитическая сыворотка).

В группу КСР кроме реакции связывания комплемента с кардиолипиновым и трепонемным антигенами, включена реакция на стекле (экспресс-метод). Выраженность гемолиза при РВ обозначается плюсами:

резко положительная - 4 +; положительная - 3 +; слабоположительная - 2 + или 1 +; отрицательная - -.

Имеет значение и постановка реакции по количественному методу, т. е. с различными разведениями сыворотки (1:10; 1:20 и т.д. до 1:320). Многочисленность стандартных серологических реакций объясняется антигенной мозаичностью бледных трепонем, в связи с чем в сыворотке крови больных возникает соответствующая множественность антител (комплементсвязывающие, агглютинины, преципитины, иммобилизины, антитела, вызывающие иммунную флюоресценцию и др.). В каждой стадии сифилиса могут преобладать те или иные антитела и, следовательно, реакции с одними антигенами могут быть уже положительными, а с другими - еще отрицательными. Кроме того, относительная специфичность стандартных серологических реакций вызывает необходимость во избежание диагностических ошибок пользоваться не одной из них, а комплексом реакций. КСР становятся положительными в конце 3-й или в течение 4-й недели после появления твердого шанкра. Эти реакции бывают резко положительными и в значительном разведении сывороток практически у всех больных вторичным свежим (98-99%), вторичным рецидивным (100%), третичным активным (70-80%) и третичным скрытым (50-60%) сифилисом. Однако КСР не является строго специфичным комплексом реакций для сифилиса. Они могут оказаться положительными у больных лепрой, туберкулезом, бруцеллезом, малярией, красной волчанкой, а также при пневмонии, заболеваниях печени, онкологических болезнях, после приема алкоголя, жирной пищи, во время беременности, особенно во второй ее половине, а также в течение первых 2 нед. после родов. С возрастом количество неспецифических ложноположительных результатов КСР увеличивается.

Для обоснованного диагноза сифилиса наряду с данными КСР учитываются клинические данные, результаты исследования на бледную трепонему в манифестных проявлениях первичного и вторичного сифилиса, данные других серологических реакций - РИБТ и РИФ.

РИБТ основана на феномене обездвиживания бледных трепонем антителами типа иммобилизинов, имеющимися в сыворотке крови больных сифилисом. В качестве антигена для РИБТ используют взвесь бледных трепонем, полученных из тканей сифилитического орхита кролика. Бледные трепонемы после добавления к ним сыворотки крови больного прекращают движение, т. е. происходит их иммобилизация. Результаты реакции оценивают в процентах: положительная РИБТ констатируется при иммобилизации от 51 до 100% бледных трепонем, слабоположительная - от 31 до 50%, сомнительная - от 21 до 30% и отрицательная - от 0 до 20%. Реакцию ставят в условиях анаэробиоза. Иммобилизины появляются в сыворотке крови больных позднее, чем другие антитела, поэтому РИБТ становится положительной позже, чем КСР и РИФ. РИБТ является наиболее специфичной из существующих реакций на сифилис. Ее основное назначение - распознавание ложноположительных результатов при постановке КСР. Это особенно важно в отношении больных, у которых сифилис протекает скрыто без наружных проявлений, но с поражением внутренних органов или нервной системы. Особенное значение имеет РИБТ при распознавании ложноположительных результатов КСР у беременных. Следует помнить, что неспецифические положительные результаты РИБТ возможны и у больных саркоидозом, красной волчанкой, туберкулезом, циррозом печени и др. Однако при этих заболеваниях РИБТ бывает слабоположительной (от 30 до 50%) и никогда не достигает 100%). При лечении антибиотиками результаты РИБТ становятся негативными. Поэтому исследования с помощью РИБТ проводятся только через 7 дней, если вводились водорастворимые антибиотики, и через 25 дней после окончания лечения дюрантными антибиотиками.

РИФ - более чувствительная реакция, поэтому она бывает положительной уже в первичном серонегативном периоде сифилиса у 80% больных. По степени специфичности РИФ уступает РИБТ, что не позволяет заменить ею РИБТ, хотя техника ее значительно проще. Реакцию ставят в нескольких модификациях: РИФ-10, РИФ-200 и РИФ-абс. (абсорбированная). РИФ-10 более чувствительна, а РИФ-200 и РИФ-абс. более специфичны. Принцип реакции заключается в том, что специфический антиген (бледные трепонемы) соединяют с сывороткой крови больного (антитела) и антивидовой флюоресцирующей сывороткой (кроличья сыворотка против глобулинов человека, соединенная с флюоресцеином, - веществом, светящимся при ультрафиолетовом свете). При положительной реакции в люминесцентном микроскопе можно видеть желто-зеленое свечение бледных трепонем, поскольку они оказываются окруженными прилепляющимися к ним флюоресцирующими антителами. Степень свечения оценивается плюсами, как и при КСР. Положительная реакция констатируется 4 +, 3 + и 2. +. При степени свечения 1 + и отсутствии свечения реакция считается отрицательной. При вторичном сифилисе РИФ положительна почти в 100% случае. Она всегда положительна при латентном сифилисе (99-100%), а при третичных формах и врожденном сифилисе положительна в 95-100%.

Экспресс-метод (микрореакция на стекле). В этой реакции, так же как и при КСР, используют кардиолипиновый антиген, одну каплю которого смешивают с 2-3 каплями сыворотки крови обследуемого человека в лунках специальной стеклянной пластины. Реакция протекает по механизму преципитации. Общая продолжительность постановки реакции 10-40 мин. Результат оценивают по количеству выпавшего осадка и величине хлопьев; выраженность реакции обозначают плюсами: 4 +, 3 + и т.д., как и КСР. Микрореакция на стекле менее специфична лля больных сифилисом, чем РВ, но несколько превосходит ее по чувствительности. Ложноположительные результаты при экспресс-методе получают чаще, чем при РВ. Поэтому этот метод разрешен для применения только как отборочная реакция при массовых обследованиях населения, диспансеризации и обследовании больных в клинико-диагностических лабораториях соматических больниц. Окончательный диагноз сифилиса на основании этого метода устанавливать запрещено. Только экспресс-метод нельзя применять при обследовании доноров, беременных, а также для контроля после лечения больных сифилисом.

Для диагностики сифилиса можно использовать и другие методы: иммуноферментный анализ (ИФА) с реакцией микропреципитации (РПМ) или реакцией пассивной гемагглютинации (РПГА) с РМП (в том числе зарубежных аналогов РМП - RPR или VDRL).

При проведении клинико-серологического контроля после специфического лечения (для определения эффективности терапии) допускается количественное исследование РМП (изучение титра реакции в динамике).

Иммуноферментный анализ (ИФА, Elisa). Принцип реакции заключается в соединении сифилитического антигена, сорбированного на поверхности твердофазного носителя, с антигеном испытуемой сыворотки крови и выявления специфического комплекса антиген-антитело с помощью антивидовой иммунной сыворотки, меченной ферментом. Чувствительность и специфичность ИФА аналогичны РИФ.

Реакция пассивной гемагглютинации (РПГА). Макромодификацию этой реакции именуют ТРНА, микромодификацию - МНА-ТР, автоматизированный вариант - АМНА-ТР.

IgM-серология. В последние десятилетия широко изучается динамика образования антител в организме больных сифилисом до, в процессе и после окончания лечения. Это вызвано тем, что у пациентов, полноценно леченных по поводу сифилиса, в течение длительного времени остаются положительные результаты специфических серологических реакций на сифилис, что усложняет решение вопроса об излеченно-сти больных, а также постановку диагноза раннего врожденного сифилиса. Затруднена также дифференциальная диагностика рецидива заболевания и реинфекции. При изучении антителообразовния в организме больных сифилисом было установлено, что первыми после заражения вырабатываются специфические IgM, выявляемые уже на второй неделе после заражения и достигающие максимальной концентрации в крови на 6-9 неделе. Через 6 мес. после окончания терапии у большинства больных в крови они не определяются. На четвертой неделе после инфицирования организм начинает продуцировать специфические IgG. Этот вид иммуноглобулинов в наибольшем количестве определяется через 1-2 года после заражения. Следует обратить внимание на то, что специфические IgM перестают вырабатываться при исчезновении из организма антигена, а секреции IgG продолжается клонами клеток памяти. Кроме того крупные молекулы IgM не проходят через плаценту от матери к плоду, в связи с чем по их наличию у ребенка судят об его инфицировании бледной трепонемой. Ввиду того, что концентрация в крови специфических IgM закономерно снижается с течением времени, рост титра этих антител может служить вспомогательным признаком наличия рецидива заболевания или реинфекции.

Чтобы врачу поставить точный диагноз на сифилис, нужна дополнительная и точная информация, поэтому пациента направляют на обследование, состоящее из нескольких видов анализов .

Одним из самых распространенных способов обнаружения трепонем - это исследование в темном поле микроскопа. Благодаря такому методу, специалист может видеть «живой» микроорганизм в действии. Можно отслеживать и движения бледной трепонемы, а также видеть все особенности её строения. Чтобы начать такой анализ, необходимо добыть материал, который можно взять с поверхности шанкра или очагов эрозии.

Благодаря кср на сифилис, эффективность лечения значительно возрастает, есть возможность ставить прогнозы на дальнейший исход заболевания. С помощью реакции на сифилис устанавливается полная программа терапии и контроль над состоянием больного пациента. Уровень пораженности серологических реакций обозначают крестиком и различаются так:

• - отрицательная;
• 1+ - слабоположительная;
• 2+ - слабоположительная;
• 3+ - положительная;
• 4+ - резко положительная.

Кср на сифилис используется для диагностики всех форм этого венерического заболевания, в обследовании пациентов, имевшие незащищенный секс с инфицированным человеком, людям, подозревающихся на наличие бледных трепонем, а также беременным женщинам - для исключения наличия бледной трепонемы в организме.

В случае положительной Кср реакции на сифилис в результате проведённого анализа, для полной картины врач венеролог назначает ряд дополнительных анализов, и только после получения и рассмотрения результатов, ставит диагноз и определяет эффективную программу лечения. На сегодняшний день, медицина предоставляет возможность провести следующие дополнительные тесты:

• РВ (реакция Вассермана). Часто может давать ложноположительный результат.
• РИФ (реакция иммунофлюоресценции или метод Кунса). Имеется три метода: прямой, непрямой и с комплементом. Реакция Кунса помогает выявить антигены микробов или обнаружить наличие антител.

Благодаря проведению кср и дополнительных исследований, ошибки в диагностировании быть не должно. А значит, врач венеролог сможет расписать продуктивную программу лечения, прогнозировать течение заболевания и его излечимость. Ведь, чем раньше вы начнёте лечение, тем больше вероятности того, что эта болезнь не принесёт вам непоправимого вреда для всего организма. Сифилис - опасная и заразная болезнь, не лечение которой неминуемо приводит к смерти.

Если сифилис не лечить, у больного через несколько лет начинают разрушаться внутренние органы. Человек может страдать десятилетиями, а смерть будет болезненной. Анализ на сифилис позволяет вовремя диагностировать заболевание и назначить лечение, прежде всего – антибиотикотерапию. Сколько времени уйдет на лечение, зависит от стадии заболевания и правильно назначенного лечения: на начальном этапе от болезни можно избавиться за три-четыре месяца. Самостоятельно сифилис не лечится.

Возбудителем сифилиса является бактерия, которая называется Бледная трепонема (Treponema pallidum). Она способна проникнуть в организм даже через незначительные повреждения, и хоть передается в основном половым путем, человек может заразиться и через предметы обихода. Правда, следует знать, что бактерия погибает через полчаса при температуре выше 48 градусов. Вот почему важна стерилизация.

Выделяют первичную, вторичную, латентную и третичную стадии сифилиса. Первые признаки недуга – это язва на коже, которая исчезает примерно через 5 недель . Спустя два месяца появляются признаки вторичного сифилиса в форме сыпи, язв и узелков. Одним из тяжёлых осложнений этой формы является поражение почек. Это состояние сопровождается протеинурией – повышенным содержанием белка в тесте мочи (выше 2-3 г/л). Обычно сыпь проходит через несколько недель без лечения.

Если болезнь не лечить, развивается третичный сифилис. Он проявляется через пять лет, когда происходит разрушение внутренних органов. Поражается нервная, сердечно-сосудистая системы, спинной и головной мозг. Выходят из строя почки, печень, желудок, кишечник.

Особенно опасна ситуация, если человек болен ВИЧ. Как и сифилис, ВИЧ наиболее часто передается половым путем и трудно лечится. При этом больные сифилисом подвергаются опасности подхватить ВИЧ, а больные ВИЧ рискуют заболеть сифилисом. Если сифилис подхватил ВИЧ-инфицированный, эффективность лечения зависит от стадии заболевания: чем дольше человек болен ВИЧ, тем больше риск развития тяжёлых осложнений сифилиса (особенно, если ВИЧ-инфицированный не лечится).

Как берут анализ

Если говорить о том, откуда забирают кровь на сифилис, то ответ таков: как и для определения ВИЧ, материал берется из вены. Иногда врач может назначить взять образец из пальца, но только при проведении неспецифических быстрых тестов. Связано это с тем, что многие нормы разработаны для венозной крови: в крови, взятой из пальца, показатели иные. Кроме того, из пальца материала на изучение можно получить меньше, чем из вены. Если же надо взять образец для анализа на сифилис из пальца, применяется та же лабораторная техника, как и для общего анализа крови.

Если исследование крови из пальца показало вероятность наличия бледой трепонемы, необходимо провести более развернутое, расширенное исследование. Кровь на сифилис в этом случае берут только из вены: лишь в этом случае можно получить правильный отрицательный или положительный результат.

Такая разновидность анализа, как мазок, в случае с сифилисом, как и с ВИЧ, неэффективна. В мазке возбудитель болезни отсутствует на всех стадиях заболевания.

Виды исследования

Для определения антител к бледной трепонеме в крови применяются следующие тесты:

• РИФ или FTA (реакция иммунофлюоресценции) – определяется реакция поглощения флюоресцирующих антител.
• РПГА или TPHA (реакция пассивной гемагглютинации) – анализ на сифилис, выявляющий антитела IgM и IgG.
• ИФА или ELISA – название расшифровывается как иммуноферментный анализ, определяет количественное содержание антител IgG и IgM.

Сифилис позволяют обнаружить трепонемные и нетрепонемные анализы. Первый тест на сифилис обнаруживает в крови антитела против антигенов к Treponema pallidum. Второй выявляет антитела против тканей, что разрушила бактерия.

ИФА является эффективным тестовым методом, который делается не только, чтобы определить наличие инфекции, но и определить стадию болезни. Кроме того, ИФА способен дать ответ на вопрос, болел ли данный человек когда-нибудь сифилисом. Чувствительность ИФА может достигать 90%.

Анализ ИФА позволяет определить антитела к Бледной трепонеме: иммуноглобулины – G, M, A. Их концентрация позволяет проследить процесс заболевания в его динамике.

Сразу после инфицирования иммунитет для борьбы с бактерией вырабатывают антитела IgA, через две недели – IgM. Через месяц появляются IgG . Когда начинают проявляться клинические симптомы недуга, кровь на сифилис показывает достаточное количество антител всех трех видов.

Исследования показывают, что специфические к сифилису антитела IgM резко уменьшаются после эффективного лечения. Особенность антител IgG состоит в том, что тест на сифилис выявляет их даже через большое время после излечения и на протяжении всей жизни пациента. Поэтому положительный результат ИФА не всегда значит наличие возбудителя сифилиса. Положительный тест может определить как стадию развития заболевания, так и то, что недавно было проведено эффективное лечение, а потому антитела еще циркулируют в крови. Отрицательный результат ИФА может означать как отсутствие заболевания, так и его раннюю стадию.

Реакция пассивной гемагглютинации

РПГА относится к специфическим трепонемным методам выявления возбудителя бледной трепонемы. При проведении анализа РПГА во время реакции антител и эритроцитов происходит слипание последних и выпадение их в осадок. Сколько осаждённых эритроцитов образуется при РПГА, прямо пропорционально к количеству антител трепонемы.

Чувствительность РПГА намного эффективнее во вторичном и третичном периоде сифилиса – 99%, тогда как в первичном достоверность анализа составляет 85%.

Специфичность РПГА позволяет его использовать для подтверждения диагноза других тестов, таких, как RPR или МРП. В тоже время РПГА не является настолько чувствительным к стадиям сифилиса, так как ИФА. Поэтому РПГА и ИФА надо рассматривать в комплексе друг с другом. Ложный, положительный результат РПГА возможен в 2,5 % случаев. Это возможно из-за сходства иммуноглобулинов с другими антителами, что выделяются при некоторых других заболеваниях, например, аутоиммунных.

Реакция Вассермана

Комплекс серологических реакций (КСР), один из которых известен как реакция Вассермана, является ценным диагностическим методом. Он позволяет как выявить инфекцию, так и определить стадию заболевания. Анализ крови на сифилис КСР в обязательном порядке должен быть дополнен трепонемно-специфическими методами анализа (РИБД и ИФА). Для проведения теста КСР используют антигены, извлеченные из сердечной мышцы крупного рогатого скота, которые по своим свойствам схожи с антигенами бледной трепонемы.

КСР не является специфичным анализом для сифилиса: положительный КСР возможен у больных туберкулёзом, малярией, при аутоиммунных заболеваниях, онкологии, во время беременности и других состояний. Анализ на сифилис при беременности сдавать обязательно, поскольку наличие этого заболевания у беременной может привести к выкидышу или рождению ребенка с врождённым недугом.

Экспресс-метод являет собой ускоренный вариант реакции Вассермана. При проведении экспресс-теста на сифилис также используют кардиолипидный антиген, который смешивают с сывороткой в выемке специальной стеклянной пластины.

Сколько времени уходит на выполнение теста, часто зависит от техники проведения. Обычно время выполнения экспресс-метода составляет около получаса.

Результат реакции экспресс-метода оценивается так же, как и КСР, положительными числами, от 0 до +4. Чувствительность экспресс-метода хоть и превосходит КСР, может выдать ложный положительный результат из-за другой болезни.

ОРС и УМСС являются ещё одним вариантом реакции Вассермана или экспресс метода. Расшифровка аббревиатуры УМСС обозначает ускоренный метод на скрытый сифилис. ОРС расшифровывается как отборочная реакция на сифилис. При проведении ОРС используются те же реактивы, что и при реакции Вассермана.

Как оценить результат

Чтобы получить точные данные, кровь на сифилис надо сдавать натощак. Понятие, натощак означает, что между приёмами пищи должно пройти не менее восьми часов. Если пациент пришёл сдавать анализ натощак, но последний раз принимал пищу меньше, чем за восемь часов, ему необходимо подождать. Понятие натощак также значит, что нельзя употреблять перед анализом любые напитки, кроме негазированной воды. Анализы сдают натощак не только для диагностики сифилиса: это общее правило.

Отрицательный анализ на сифилис обозначается знаком «-». Но отрицательный результат не всегда означает, что возбудителя болезни в организме нет. Чаще ложный отрицательный результат бывает при расшифровке быстрых тестов, основанных на реакции Вассермана. Поэтому расслабиться можно лишь тогда, когда данные всех анализов дадут отрицательный результат.

Самым высоким рейтингом доверия среди больных сифилисом является результат ПЦР . Если ПЦР положительный, это значит, что он действительно положительный. Если расшифровка отрицательна, то – отрицательный. Но ПЦР способен показать положительный результат и после успешного лечения, поскольку способен определить наличие как живой, так и мертвой бактерии. Ложный результат после успешного лечения могут выдать и другие тесты.

Анонимность лечения

Люди, особенно мужчины, нечасто выражают желание регулярно обследоваться у врача. Что касается сифилиса, то причиной этого может быть, как не проявляющие себя симптомы вялотекущего заболевания, так и стыд, нежелание, чтобы окружающие узнали о болезни.

Поэтому очень многие часто соглашаются пройти анонимное обследование, при этом хотят получить гарантию, что лечение также будет действительно анонимным. Конечно же, анонимно сдать анализ на сифилис проблем нет. Они возникают, когда больной хочет анонимно лечиться. Дело в том, что человек является носителем опасной венерической болезни и может заразить как близких ему людей, так и постороннего человека. Поэтому медлить ни в коем случае нельзя и во время лечения обязательно выполнять все указания врача.