Автор (ы):
С.К. Собакина, П.В. Белокопытов, А.Н. Лапшин, С.Г. Атанасова, А.А. Иванова
Организация(и):
Инновационный ветеринарный центр Московской ветеринарной академии
Журнал:
№5 - 2018
УДК 619:616.24
Ключевые слова: бронхоальвеолярный лаваж, бронхоальвеолы, бронхоскопия. Key words: bronchoalveolar lavage, bronchoalveoli, bronchoscopy/
Сокращения: БАЛ – бронхоальвеолярный лаваж, ПАВ – поверхностно-активное вещество
Цель исследования: описать существующие техники проведения бронхоальвеолярного лаважа
Абстракт
Бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ) – это минимально инвазивная техника, используемая в гуманной и ветеринарной медицине для отбора проб из бронхов нижнего порядка и альвеолярных пространств.
Отбор проб БАЛ используется для изучения врожденного, клеточного и гуморального клеточного ответа, обусловленного наличием популяции клеток, которые могут облегчить диагностику различных диффузных заболеваний легких.
Bronchoalveolar lavage (BAL) is a minimally invasive technique utilized in human and veterinary medicine to sample the lower generation bronchi and alveolar spaces.
BAL sampling is used to study the congenital, cellular and humoral cellular response due to the presence of a cell population caused by the presence of a population of cells that can facilitate the diagnosis of various diffuse pulmonary diseases.
Bronchoscopy and BAL can provide definitive diagnoses in cases of inflammatory airway disease, bronchiectasis, eosinophilic pneumonia, pulmonary parasites, bacterial pneumonia, mycotic pneumonia and neoplasia.
Показанием для проведения БАЛ являются кашель, неясные или отсутствие изменений на рентгенограмме легких, несмотря на проявление клинических признаков, соответствующих заболеваниям респираторного тракта, новообразования легких, пневмония, стридор, удаление обструкции бронхиальной слизью.
Противопоказаниями к проведению БАЛ являются одышка (относительное противопоказание) и коагулопатия.
Есть несколько критериев, гарантирующих попадание раствора в нижние дыхательные пути (бронхоальвеолы): процент извлекаемой жидкости и наличие слоя ПАВ.
Более высокий процент извлеченного раствора (около 50%) говорит об отборе проб из нижних дыхательных путей. Медиана извлеченного раствора у собак 42-48%, у кошек 50-75%. В свою очередь, небольшое количество извлеченной жидкости (< 40%) говорит о том, что проба взята из крупных дыхательных путей .
Поверхностно-активное вещество (ПАВ) – это фосфолипиды, белки и ионная смесь, секретируемая пневмоцитами типа II в эпителиальную альвеолярную поверхность для снижения альвеолярного поверхностного натяжения. Поскольку легочное поверхностно-активное вещество в дыхательных путях присутствует только в альвеолярной эпителиальной выстилке, присутствие ПАВ в БАЛ подтверждает, что отбор проб был произведен именно из альвеол. В пробах БАЛ ПАВ проявляется в виде пены (рис. 1).
Рис. 1. Присутствие ПАВ в образце жидкости БАЛ
Цитологический анализ остается основой оценки БАЛ. В норме у здорового животного в БАЛ содержатся макрофаги, лимфоциты, нейтрофилы, эозинофилы и тучные клетки.
Образцы жидкости БАЛ считаются неприемлемыми, если они были загрязнены из других областей дыхательных путей или не представляют собой бронхоальвеолярную среду .
Техника проведения БАЛ
Основная техника БАЛ включает в себя вливание стерильного изотонического раствора в нижние дыхательные пути и аспирацию этого раствора. БАЛ может быть проведен вслепую, путем проведения катетера в легкие через эндотрахеальную трубку, с бронхоскопической ассистенцией или под контролем рентгеноскопии. Бронхоскопически-ассистированный БАЛ позволяет визуализировать нижние дыхательные пути и направлять БАЛ в наиболее пораженные доли легких .
Проведение БАЛ у собак
Заболевание нижних дыхательных путей у собак приводит к структурным изменениям в бронхах (например, утолщение слизистой оболочки, повышенная экссудация) и изменениям в нормальной популяции клеток эпителиальной выстилки .
БАЛ у собак проводится под общей анестезией. Пациентам, проходящим процедуру БАЛ, рекомендуется поддержка оксигенотерапии во время и некоторое время после проведения процедуры, пока сатурация не придет к норме .
Во время проведения «слепого» БАЛ перорально в трахею через стерильную эндотрахеальную трубку вводится стерильный уретральный катетер до тех пор, пока он осторожно не вклинится в дистальный бронх, почувствовав при этом сопротивление. Необходимо проявлять осторожность, чтобы не завести катетер слишком далеко в дыхательные пути и не спровоцировать ятрогенный пневмоторакс, повредив ткань легкого трансбронхиально. После введения от трех до пяти раз вводится 25 мл или 5 мл/кг (по разным данным) теплого (37 С) стерильного изотонического раствора сразу же проводится аспирация(транстрахеальный смыв) и затем проводится 2-3 мануальных вдоха мешком Амбу. После этого остаток жидкости аспирируется самотеком или с помощью аспиратора. Иногда подниманием задней части животного можно увеличить количество извлекаемой жидкости (рис. 2).
Рис. 2. Поднятие задней части тела животного для увеличения количества извлекаемой жидкости
Данный метод БАЛ зачастую обеспечивает лаваж каудальных долей легких (рис. 3) .
Рис. 3. Набор инструментов для проведения БАЛ
Во время бронхоскопического БАЛ бронхоскоп вводится перорально в трахею. До выполнения БАЛ проводится полное бронхоскопическое обследование. Как только участок лаважа идентифицирован, бронхоскоп осторожно вклинивается в субсегментный бронх. Плотное прилегание бронхоскопа к исследуемому бронху обеспечивает максимальное извлечение введенного раствора. Когда достигнуто плотное прилегание к бронху, через биопсийный канал бронхоскопа вводится теплый (37С°) изотонический раствор. Рекомендуется введение теплого изотонического солевого раствора для снижения риска возникновения бронхоспазма. От 1 до 4 раз вводится в общей сумме от 5 до 50 мл раствора (1-2 мл/кг). Проведенные исследования обнаружили, что использование объема в расчете мл/кг веса приводит к большему объему извлеченной жидкости. Введение небольшого количества раствора может быть недостаточным для достижения альвеол. После того, как физиологический раствор был введен в дыхательные пути, происходит немедленная аспирация при помощи шприца или с помощью аспиратора, соединенного последовательно с аспирационным клапаном бронхоскопа или с уретральным катетером через стерильную пробирку для сбора проб. Отсутствие раствора при аспирации может быть из-за коллапса дыхательных путей и следует накладывать меньше усилий на шприц для аспирации. Если отрицательное давление все еще присутствует, бронхоскоп можно быть оттянут на несколько миллиметров, но в этом случае объем полученной жидкости может быть меньше. Рекомендуется отбирать пробы БАЛ из нескольких долей легких даже при диффузном поражении легких. Пациентам с очаговыми поражениями легких (аспирационная пневмония) следует выполнять БАЛ только из пораженной доли легкого. Если получен недостаточный объем раствора или если нет пены, процедуру следует повторить .
Исследования гуманной медицины показало, что бронхоскопически-ассистированный БАЛ обеспечивает образцами более высокого диагностического качества и надежности, чем неконтролируемая техника . Но особенностью и особым вниманием, которое надо проявлять к применению данной техники в ветеринарной медицине, по нашему мнению, является сложность в подготовке инструментального канала к исследованию для исключения контаминации флорой инструментального канала бронхоскопа образцов БАЛ.
Проведение БАЛ у кошек
Рис. 4. Проведение БАЛ кошке
Меньший размер респираторного тракта у кошек делает бронхоскопию трудной. С этим связано большее количество осложнений по сравнению с другими видами животных. Например, в ретроспективном обзоре гибкой бронхоскопии и БАЛ у кошек в ветеринарном центре выявлено 38% осложнений по сравнению с 5% у людей. Большинство (24%) осложнений в этом обзоре считаются умеренными (например, десатурация гемоглобина). Рекомендуется предварительное введение ингаляционных бронходилататоров (сальбутамол, ипратропия бромид) перед БАЛ у кошек. БАЛ у кошек проводится аналогично с БАЛ у собак. Объем вводимого раствора варьируется до 20 мл или 3-5 мл/кг, чаще всего достаточно 2-3 введений (рис. 4) .
Проведенные исследования, сравнивающие 2 метода аспирации: мануальный и при помощи отсоса, показали, что аспирация посредством отсоса дает большее количество аспирируемой жидкости и более качественные образцы, однако это не влияет на окончательные результаты анализа БАЛ .
Рентгеноскопически-ассистированный БАЛ
В ретроспективном исследовании проведен рентгеноскопически-ассистированный БАЛ кошкам. Интубированному пациенту вводился 0,035“ гидрофильный проводник, по которому вводился 8Fr красный резиновый катетер. БАЛ проведен посредством двукратного введения 5 мл стерильного физиологического раствора, который был аспирирован 20 мл шприцом. В результате проведения рентгеноскопически-ассистированного БАЛ только катетеризация краниальной правой доли легких закончилась безуспешно, катетеризация остальных долей легких проведена успешно, результаты цитологического анализа отвечали всем необходимым требованиям. Следовательно, рентгеноскопически-ассистированный БАЛ может являться практичной, надежной и безопасной методикой для отбора проб из всех долей легких, кроме краниальной правой доли (рис. 5, 6) .
Рис. 5. Проведение рентгеноскопически-ассистированного БАЛ собаке
Рис. 6. Визуализация при рентгеноскопии во время проведения БАЛ
Побочные эффекты и осложнения после проведения БАЛ
Незначительные осложнения могут включать кровотечение, стойкую гипоксемию, бронхоспазм и вазовагальный обморок. Основные осложнения включают пневмонию, аритмии, пневмоторакс, пневмомедиастинум, дыхательную недостаточность и остановку сердца .
Всем пациентам после проведения БАЛ необходима дополнительная оксигенация. Если отмечается цианоз или снижение сатурации, необходима дополнительная оксигенация. Если пациенту не достаточно дополнительной оксигенации, следует рассмотреть другие причины, такие как бронхоспазм или пневмоторакс. Также после любой процедуры лаважа может быть временное ухудшение дыхательной функции или кашель .
Сообщается о случаях спонтанного пневмоторакса. Редко, но осложнения после проведения БАЛ могут быть фатальными, такие пациенты либо имели респираторный дистресс-синдром до проведения БАЛ, либо было невозможно восстановить адекватную оксигенацию и вентиляцию после процедуры .
Сообщается о 2% показателе смертности/эвтаназии (2/101). В этом исследовании смертность связана с предшествующим процедуре БАЛ респираторным дистресс-синдромом. Данные находки приводят к выводу, что предшествующая одышка является относительным противопоказанием к проведению БАЛ. Также сообщается о значительном бронхоспазме после проведения БАЛ у собак с эозинофильными заболеваниями дыхательных путей, который купировался при помощи бронходилататоров и оксигенации. В ретроспективном обзоре гибкой бронхоскопиии БАЛ у кошек сообщается о том, что 6% кошек требовалась ночная госпитализация и проведение оксигенотерапии, у 3% развился пневмоторакс и у 6% смертность или эвтаназия были связана с невозможностью восстановления вентиляции после процедуры. Зарегистрировано значительно меньше осложнений у кошек, которые предварительно получили тербуталин 0,01 мг/кг п/к за 12-24 час. перед проведением бронхоскопии и БАЛ (8%) по сравнению с кошками, которые предварительно ничего не получали (40%). Предварительное получение ингаляционных бронходилататоров (сальбутамол, ипратропия бромид) перед БАЛ предупреждает бронхоконстрикцию у аллерген-чувствительных кошек. Таким образом, в настоящее время рекомендуется предварительное получение бронходилататоров перед бронхоскопией у кошек .
Анализ жидкости БАЛ
Для достижения наилучших результатов обработка образцов БАЛ должна выполняться в течение часа после сбора. При оценке цитологии следует оценивать пробы лаважа с каждой доли в отдельности. В одном из исследований 37% собак имели разные результаты, когда оценивали образцы из разных легочных долей.
В каждом образце необходимо подсчитать не менее 200 клеток. Наиболее распространенным типом клеток, выделенным в БАЛ, является альвеолярный макрофаг. Жидкость БАЛ кошек в норме содержит большее количество эозинофилов по сравнению с другими видами .
Большинство собак с бактериальными инфекциями имеют нейтрофильное воспаление. У собак с хроническим бронхитом чаще всего наблюдается смешанное воспалительное или нейтрофильное воспаление. Увеличение количества эозинофилов (от 20% до 450%) наблюдается у собак с эозинофильной бронхопневмонией. Также, смешанное воспаление часто встречается при наличии грибковых инфекций .
Нейтрофильное воспаление с наличием или без внутриклеточных бактерий может наблюдаться у кошек с пневмонией. Кошки с бронхитом или астмой часто имеют повышенное содержание эозинофилов. Однако нейтрофильное и эозинофильное воспаления не являются патогномоничным для инфекционного или иммунологического процесса, поскольку как эозинофильное, так и нейтрофильное воспаления также можно наблюдать при неоплазии.
Достаточно трудно диагностировать неоплазии из образцов, полученных при БАЛ. Все клетки должны быть исследованы по критериям злокачественности. В небольшом исследовании кошки с гистологически диагностированной карциномой показали нейтрофильное воспаление, но никаких признаков рака не было обнаружено в цитологии жидкости, полученной при БАЛ. Другое исследование показало значительное совпадение количества дифференциальных клеток у кошек с пневмонией, бронхитом и неоплазией. По этим причинам подсчет клеток БАЛ следует интерпретировать в сочетании с клиническими признаками и данными рентгенографии и бронхоскопии.
В норме дыхательные пути не являются стерильными, вследствие чего количественный расчет бактериальных клеток может помочь дифференцировать контаминацию от реальной инфекции дыхательных путей. Содержание более чем 1,7 *10 3 колониеобразующих единиц на миллилитр характерно для наличия бактериальной бронхопневмонии. Во всех полученных образцах необходимо проводить анализ на наличие аэробов и микоплазм. Анализ на наличие грибков следует проводить в эндемических районах.
Сообщается об использовании ПЦР в диагностике видов Micoplasma, Bordetella bronchiseptica и Toxoplasma gondii . Результаты ПЦР должны быть интерпретированы с осторожностью в связи с тем, что Mycoplasma и Bartonella в норме могут присутствовать в ротоглотке у собак и кошек. Следовательно, положительные результаты не гарантируют того, что данные патогены вызывают текущие клинические признаки у пациента. К тому же отрицательный результат не исключает наличие инфекции. Несмотря на то, что микроорганизм может присутствовать в дыхательных путях, он может быть не представлен в небольшом образце, используемом для экстракции ДНК, в итоге получая ложно-отрицательный результат .
Таблица 1.
Цитология после проведения БАЛ
.
Рис. 7. Сегментоядерные нейтрофилы и альвеолярные Рис. 8. Реснитчатый респираторный эпителий
макрофаги на фоне слизи
Рис. 9. Сегментоядерные нейтрофилы на фоне Рис. 10. Конгломерат клеток эпителия
эозинофильного
розового межуточного вещества – слизи
Выводы
Диагностическое значение данной процедуры не должно быть переоценено, потому что пациенты с заболеваниями дыхательных путей имеют повышенные риски, связанные с анестезией и респираторными процедурами. Риск проведения процедуры всегда должен быть оценен с точки зрения ожидаемых результатов. Также, как показывают исследования, БАЛ при сопровождении бронхоскопии имеет меньшее количество осложнений и большую диагностическую ценность полученных образцов. Выбор методики также может быть сделан на основании материальной базы ветеринарного учреждения, но в любом случае выполнение БАЛ должно быть регламентировано технически и выполнено подготовленными специалистами.
Литература
1. Carol R. Reinero, DVM, PhD, Diplomate ACVIM (Internal Medicine), University of Missouri–Columbia. Bronchoalveolar Lavage Fluid Collection Using a Blind Technique.
2. Standardization of Bronchoalveolar Lavage Aspiration Techniques to Optimize Diagnostic Yield of Canine Lower Respiratory Tract Samples by Katharine Sarah Woods.
3. Mills PC, Lister AL. Using urea dilution to standardize cellular and non-cellular components of pleural and bronchoalveolar lavage (BAL) fluids in the cat. J. Fel. Med. Surg. 2006; 8:105-110. Mordelet-Dambrine M., Arnoux.
4. Melamies MA, Jarvinen AK, Seppala KM, Rita HJ, Rajamaki MM. Comparison of results for weight-adjusted and fixed-amount bronchoalveolar lavage techniques in healthy Beagles. Am. J. Vet. Res. 72:694–698, 2011.
5. Chalker VJ, Owen WM, Paterson C, et al. Mycoplasmas associated with canine infectious respiratory disease. Microbiology 150:3491–3497, 2004.
6. Creevy KE. Airway evaluation and flexible endoscopic procedures in dogs and cats: laryngoscopy, trans-tracheal wash, tracheobronchoscopy, and bronchoalveolar lavage. Vet Clin North Am Small Anim Pract 2009; 39:869-880
7. Spector D, Wheat J, Beamis D, Rohrbach B, Taboada T, Legendre AM. Antigen testing for the diagnosis of Blastomycosis. J Vet Intern Med 20:711–712, 2006.
8. Egberink H, Addie D, Belak S, et al. Bordetella bronchiseptica infections in cats. J Fel Med Surg 11:610–614, 2009.
9. Anfray P, Bonetti C, Fabbrini F, Magnino S, Mancianti F, Abramo F. Feline cutaneous toxoplasmosis: a case report. Vet Dermat 16:131–136, 2005.
10. American Thoracic Society. Bronchoalveolar lavage guidelines. Jul 8, 2012.
11. Hawkins EC, Berry Cr. Use of a modified stomach tube for bronchoalveolar lavage in dogs. J Am Vet Med Assoc 1999; 215(11):1635-1638.
12. Hawkins EC, Davidson MG, Meuten DJ, et al. Cytologic identification of Toxoplasma gondii in bronchoalveolar lavage fluid of experimentally infected cats. J Am Vet Med Assoc 1997; 210(5):648-650.
13. Hawkins EC, DeNicola DB. Cytologic analysis of tracheal wash specimens and bronchoalveolar lavage fluid in the diagnosis of mycotic infections in dogs. J Am Vet Med Assoc 1990a; 197(1):79-83.
14. Hawkins EC, DeNicola DB, Kuehn NF. Bronchoalveolar lavage in the evaluation of pulmonary disease in the dog and cat: state of the art. J Vet Intern Med 1990b; 4:267-274.
15. Hawkins EC, DeNicola DB, Plier ML. Cytological analysis of bronchoalveolar lavage fluid in the diagnosis of spontaneous respiratory tract disease in dogs: a retrospective study. J Vet Intern Med 1995; 9:386–392.
16. Johnson LR, Drazenovich TL. Flexible bronchoscopy and bronchoalveolar lavage in 68 cats (2001–2006). J Vet Int MEd 2007; 21:219–225.
17. Silverstein DC, Drobratz KJ. Clinical evaluation of the respiratory tract. In: Ettinger SJ, Feldman EC, eds. Textbook of veterinary internal medicine. 7th ed. Saunders Elsevier: St Louis, 2010:1055–1066.
18. Yoneda KY, Morrissey BM. The technique of adult flexible bronchoscopy: part 1. J Respir Dis 2008; 29(11):423-428.
19. Hawkins EC. Bronchoalveolar lavage. In: King LG, ed. Textbook of respiratory disease in dogs and cats. Saunders Elsevier: St Louis, 2004:118-128.
20. Cooper ES, Schober KE, Drost WT. Severe bronchoconstriction after bronchoalveolar lavage in a dog with eosinophilic airway disease. J Am Vet Med Assoc 2005; 227 (8):1257- 1262.
21. Johnson LR, Queen EV, Vernau W, et al. Microbiologic and cytologic assessment of bronchoalveolar lavage fluid from dogs with lower respiratory tract infection: 105 cases (2001-2011). J Vet Intern Med 2013;27(2):259-267.
22. Kirschvink N, Leemans J, Delvaux F, et al. Bronchodilators in bronchoscopy induced airflow limitation in allergen-sensitized cats. J Vet Intern Med 2005;19:161-167.
23. Padrid PA. Laryngoscopy and tracheobronchoscopy of the dog and cat. In: Tams TR, Rawlings CA, eds. Small Animal Endoscopy. St. Louis, MI: Elsevier Mosby, 2011:331- 359.
24. Fluoroscopic-Guided Bronchoalveolar Lavage (F-Bal) for Sampling the Lower Airways of Cats Hooi KS1, Defarges A1 , Nykamp S1, Weese S2, Bienzle D2. Departments of Clinical Studies1 and Pathobiology2, University of Guelph, ON.
При средней и тяжелой степенях обструктивно-вентиляционных нарушений недостаточно использовать бронхолитические средства и препараты, способствующие отторжению слизистых пробок, В ряде случаев показаны механическое очищение бронхиального дерева, целенаправленный визуальный лаваж бронхов.
Отмыть каждый сегментарный бронх можно только при бронхоскопии. Под местной анестезией это невыполнимо, а для осуществления бронхоскопии в условиях наркоза обычные методы ИВЛ непригодны. Нужен такой метод ИВЛ, который не только предупредит дальнейшее усиление гипоксии и гиперкапнии, но и обеспечит оптимальный газообмен, несмотря на одновременное выполнение эндобронхиальных вмешательств через просвет бронхоскопа. Такой метод вентиляции предложил Sanders (1967). Именно при использовании этого инжекционного метода возможно последовательное тщательное промывание всех сегментов. В том случае, когда применяется двухпросветная трубка Карленса, такие условия не достижимы, промывание проводят вслепую и бесконтрольно.
Подлинное внедрение бронхиального лаважа в клинику связано с предложением Тhompson и Рryor (1964, 1966). Чтобы деблокировать мелкие и средние бронхи, Тпотрзоп в условиях бронхоскопии под наркозом поочередно катетеризировал сегментарные бронхи, вводя в них под давлением по 50 мл жидкости и тотчас через тот же катетер ее отсасывал. Нагнетание жидкости позволило механически удалять сгустки из бронхов. На весь лаваж требовалось 800-1500 мл, треть удавалось отсосать обратно, а остальное всасывалось. Thompson использовал физиологический раствор, для нормализации рН добавлял в него бикарбонат натрия, протеолитические ферменты и моющие вещества.
Самое тяжелое состояние больных, по мнению Thompson с соавторами (1966), не служит противопоказанием к бронхиальному лаважу, поскольку наилучшие результаты получены у почти умирающих больных. Наш собственный опыт применения модификации бронхиального лаважа полностью подтверждает положительную оценку такого бронхологического пособия. Однако рутинная техника бронхоскопии, даже с использованием дыхательных бронхоскопов, не обеспечивает надежных условий. Главный недостаток в том, что для посегментарного промывания бронхов необходима многократная разгерметизация дыхательного контура в связи с открытием смотрового окна бронхоскопа. При астматическом статусе и гипоксической коме какие-либо паузы в ИВЛ недопустимы. Вентилировать больных во время астматического статуса, создавая высокое давление на вдохе с помощью дыхательного бронхоскопа, затруднительно.
Проведенный в нашей клинике поиск позволил избрать вариант, полностью сохраняющий все достоинства первоначального предложения Тompson, но в условиях проведения непрерывной и эффективной ИВЛ, включая периоды длительной разгерметизации системы больной - бронхоскоп - аппарат.
При осуществлении этого метода задача заключается в том, чтобы избежать утечки газа через открытое смотровое окно бронхоскопа. Предложение Sanders предусматривало создание направленной струи кислорода в тубусе бронхоскопа (рис. 11). Для этого кислород вдувают через инжекционную иглу, встроенную в проксимальную часть тубуса. Сопротивление тонкой иглы велико, поэтому для создания достаточно мощной струи кислорода, способной поднять внутритрахеальное давление на несколько десятков сантиметров водяного столба, на входе инжекционной иглы приходится создавать давление в несколько атмосфер. Тубус бронхоскопа выполняет роль диффузора. Вдуваемая газовая струя не только идет в сторону легких, но и увлекает за собой воздух (инжекция), поэтому во время вдоха не только нет утечки кислорода, но и, наоборот, атмосферный воздух засасывается и разбавляет дыхательную смесь. Поток кислорода периодически прерывается и тогда происходит пассивный выдох в атмосферу.
Рис. 11. Направление газотока при инжекционном методе искусственной вентиляции легких во время бронхоскопии: 1-подача кислорода через инжекционную иглу тубуса бронхоскопической трубки; 2-подсос воздуха из атмосферы; 3-тубус бронхоскопа; 4-голосовая щель; 5-трахея.
Нами с инженером Л. Б. Тафлинским сконструирован специальный инжекционный бронхоскоп и автоматический инжекционный респиратор с переключением фаз по времени. Используемый модифицированный метод инжекционной вентиляции предусматривает обязательное измерение внутритрахеального давления, а также блокировку, предупреждающую чрезмерное повышение давления, раздельную регулировку продолжительности вдоха и выдоха, защиту лица бронхолога от попадания выдыхаемого больным воздуха.
ИВЛ инжекционным методом проводят «вручную» перекрытием питающего протока кислорода, для чего пережимают кислородный шланг, либо используют встроенный в шланг пневмотумблер - переключатель или специальный респиратор.
При использовании этого метода эндоскопические манипуляции практически не сказываются на параметрах ИВЛ, а бронхолог получает возможность непрерывной работы при постоянно открытом визирном окне бронхоскопа. Во время вдоха внутритрахеальное давление можно доводить до 15-40 см вод. ст., хотя возможно получение и более высокого давления. Чем тяжелее состояние больного в связи с астматическим статусом, тем более высокое давление следует создавать во время вдоха. Частота дыхания-10-15 в 1 мин. Содержание кислорода во вдыхаемой смеси следует регулировать: при крайней степени вентиляционно-обтурационных нарушений нужна вентиляция чистым увлажненным кислородом, у других больных содержание кислорода во вдыхаемой смеси можно снизить до 50-70% (рис. 12).
Рис. 12. Газы крови во время бронхиального лаважа в условиях инжекционной ИВЛ. А - исходные; Б - перед интубацией и при вентиляции чистым О 2 ; В - через 5 мин инж. ИВЛ маской; Г - через 10 мин инж. ИВЛ; Д -через 15 мин инж.ИВЛ; Е -сразу после окончания бронхоскопии и экстубации
Во время инжекционной вентиляции рО2 артериальной крови сразу существенно возрастает, а гиперкапния уменьшается. В момент введения бронхоскопа нередко возникает артериальная гипертензия, но во время бронхоскопии отмечена тенденция к нормализации артериального давления, зачастую исчезает имевшаяся ранее аритмия сердца.
Бронхоскопию и лаваж следует выполнять под внутривенным барбитуровым наркозом с релаксантами, иногда дополнительно вводя седуксен. Если бронхоспастический компонент выражен, а предварительная ингаляция фторотана облегчает состояние больного, то у таких больных для вводного наркоза и поддержания его следует использовать фторотан. Экстубацию следует производить после появления начальных признаков восстановления дыхания. Для лаважа бронхов достаточно 15- 25 мин.
Бронхи следует промывать теплым физиологическим раствором или раствором фурагина-К в смеси с физиологическим раствором. Обычно расходуется до 800 мл жидкости; примерно треть жидкости удается отсосать. В отдельных случаях жидкость настолько быстро всасывается, что обратное поступление ее незначительно.
Как правило, с промывными водами удаляется большое количество мелких колбасовидных белых сгустков, имеющих форму бронхиальных слепков (рис. 13). Выделение жидкости из легких иногда продолжается в течение первых суток после промывания, облегчая кашель и отхождение мокроты.
Рис. 13. Слепки бронхов, отмытые во время эндобронхиального бронхоскопического лаважа
Для купирования астматического статуса требуется одно, реже два промывания. Наибольшее облегчение больные отмечают через несколько часов после окончания вмешательства.
Для закрепления положительных результатов лечения через разные сроки следует проводить повторный лаваж. Применение лаважа бронхов позволяет сократить дозы гормонов у привыкших к ним больных, а у некоторых отказаться от применения стероидов. Отмечено также снижение резистентности к бронхолитическим средствам.
В настоящее время бронхиальный лаваж, именно посегментарный лаваж, целенаправленное промывание блокированных мелких бронхов жидкостью под давлением, а не «полоскание наугад» незаменимы для лечения больных с тяжелыми формами бронхиальной астмы и астматического статуса.
Микробиологическое и иммунологическое исследования БС и БАС следует проводить в том же объеме, что и исследование мокроты, и по аналогичным показаниям. Наибольшее диагностическое значение БС и БАС приобретают при оценке уровня воспаления в трахеобронхиальном дереве, при опухолях легкого и при легочном протеинозе. В настоящее время проводят биохимическое, иммунологическое исследование супернатанта БС и БАС, а также изучение клеточного осадка. При этом подсчитывают жизнеспособность клеток БС и БАС, цитограмму, проводят цитохимические исследования клеток БАЛ, а также цитобактериоскопическую оценку. В последнее время разработана методика подсчета макрофагальной формулы БАЛ при различных заболеваниях бронхолегочной системы. Исследование БАЛ позволяет с помощью измерения поверхностного натяжения и изучения фосфолипидного состава сурфактанта оценить состояние сурфактантной системы легких.
Бронхиальную порцию бронхоальвеолярного лаважа используют для проведения качественных и количественных микробиологических исследований. Помимо этого по изменениям клеточного состава БС можно определить выраженность воспалительной реакции в бронхиальном дереве. Согласно рекомендациям Европейского общества пульмонологов, для нормы характерен следующий состав БС:
Обладает высокой диагностической ценностью лишь при некоторых заболеваниях легких. К интерстициальным заболеваниям, при которых исследование клеточного состава БАС может оказаться полезным, относят гистиоцитоз X, при котором появляются клетки Лангерганса, имеющие характерные Х-тельца в цитоплазме, определяемые при электронноми-кроскопическом исследовании (по иммунофенотипу - это CD1+ клетки). С использованием БАС возможно подтвердить наличие легочного кровотечения. Исследование БАС показано при диагностике альвеолярного протеиноза, для которого характерно наличие внеклеточного вещества, хорошо определяемого при помощи световой (ШИК-реакция) и электронной микроскопии. При этом заболевании БАЛ является не только диагностической, но и терапевтической процедурой.
При интерстициальных заболеваниях легких , вызванных ингаляцией пылевых частиц, с помощью исследования БАС возможно лишь подтвердить экспозицию к пылевому агенту. Специфическая диагностика бериллиоза может быть проведена при исследовании функциональной пролиферативной активности клеток БАС в ответ на действие солей бериллия. При асбестозе в БАС можно обнаружить силикатические тельца в виде характерных волокон - так называемые «железистые» тельца. Такие асбестовые тельца представляют собой асбестовые волокна с агрегированными на них гемосидерином, ферритином, гликопротеином. Поэтому они хорошо окрашиваются при проведении ШИК-реакции и окраски по Перлсу. Описанные волокна в смыве могут быть обнаружены как вне-, так и внутрикле-точно. Крайне редко асбестовые тельца можно обнаружить у лиц, имевших непрофессиональный контакт с асбестом, при этом концентрация таких частиц в БАС не будет превышать 0,5 мл. В БАС также могут быть обнаружены псевдоасбестовые тельца, описанные для пневмокониозов, связанных с воздействием угля, алюминия, стекловолокон и др.
Бронхоальвеолярный лаваж является методом выбора при необходимости получения материала из нижних отделов легких у больных с иммунодепрессивными состояниями. При этом доказана эффективность исследования для обнаружения инфекционных агентов. Так, чувствительность БАЛ при диагностике пневмоцистной инфекции, по некоторым данным, превышает 95%.
При прочих заболеваниях исследование БАС не является высокоспецифичным, однако может дать дополнительную информацию в комплексе клинических, рентгенологических, функциональных и лабораторных данных. Так, при диффузном альвеолярном кровотечении в БАС могут быть обнаружены свободные и фагоцитированные эритроциты и сидерофаги. Это состояние может встречаться при различных заболеваниях, БАС является эффективным методом для выявления диффузного кровотечения даже при отсутствии кровохарканья, когда диагностика этого состояния крайне сложна. Следует помнить, что диффузное альвеолярное кровотечение следует дифференцировать с диффузным альвеолярным повреждением - респираторным дистресс-синдромом взрослых, при котором в смыве также появляются сидерофаги.
Одна из наиболее серьезных дифференциально-диагностических проблем - диагностика идиопатического фиброзирующего альвеолита. При решении этой задачи цитологическое исследование БАС позволяет исключить другие интерстициальные заболевания легких. Так, повышение доли нейтрофилов и эозинофилов в БАС не противоречит диагнозу идиопатического альвеолита. Значительное повышение числа лимфоцитов нехарактерно для этого заболевания, в этих случаях следует задуматься об экзогенном аллергическом альвеолите или других лекарственных или профессиональных альвеолитах.
Цитологическое исследование БАС является чувствительным методом в диагностике экзогенного аллергического альвеолита. Высокий процент лимфоцитов, наличие плазматических и тучных клеток, а также пенистых макрофагов в сочетании с анамнестическими и лабораторными данными позволяют диагностировать эту нозологию. Возможно появление в БАС эозинофилов или гигантских многоядерных клеток. Среди лимфоцитов преобладают клетки с иммунофеноти-пом CD3+/CD8+/CD57+/CD16-. Следует, однако, помнить, что в позднюю фазу болезни, спустя несколько месяцев от начала заболевания, наряду с супрессора-ми начинает расти число Т-хелперов. Другие методы исследования позволяют исключить прочие заболевания, при которых имеет место повышение лимфоцитов, - коллагеновые болезни, лекарственные пневмониты, облитерирующий бронхиолит с организующейся пневмонией или силикоз.
При саркоидозе также отмечено повышение доли лимфоцитов, однако было показано, что соотношение хелперов и супрессоров (CD4+/CD8+) выше 4 характерно именно для этой нозологической формы (чувствительность этого признака составляет, по данным разных авторов, от 55 до 95%, специфичность - до 88%). В БАС больных саркоидозом могут быть также обнаружены гигантские многоядерные клетки типа клеток «инородного тела».
При лекарственных альвеолитах морфологические изменения в легких могут быть разнообразны, часто наблюдают альвеолярный геморрагический синдром или облитерирующий бронхиолит с организующейся пневмонией. В клеточном составе БАС отмечают повышение эозинофилов, нейтрофилов, лимфоцитов, иногда возможно комбинированное повышение этих клеток. Однако чаще всего при лекарственных альвеолитах описывают повышение лимфоцитов, среди которых, как правило преобладают супрессорные цитотоксичные клетки (CD8+). Крайне высокое содержание нейтрофилов встречается, как правило, при приеме антидепрессанта номифензина, особенно в первые 24 ч. При этом доля нейтрофилов в БАС может достигать 80% с последующим ее снижением в течение 2 дней до 2%, одновременно с этим в смыве повышается доля лимфоцитов. Похожие наблюдения описаны и для экзогенного аллергического альвеолита. При приеме амиодаро-на и развитии лекарственного альвеолита (так называемое «амиодароновое легкое») происходят специфические изменения БАС, характеризующиеся появлением большого числа пенистых макрофагов. Это весьма чувствительный, но малоспецифичный признак: такие же макрофаги могут быть обнаружены и при других заболеваниях, в том числе при экзогенном аллергическом альвеолите и облитерирующем бронхиолите с организующейся пневмонией. Такие же макрофаги могут быть обнаружены у лиц, принимающих амиодарон, но без развития альвеолита. Это связано с тем, что данное вещество повышает содержание фосфолипидов, особенно в фагоцитах.
На сегодняшний день волоконно-оптическая бронхоскопия является обычной стандартной диагностической процедурой, которая позволяет непосредственно осмотреть верхние и нижние дыхательные пути. В процессе продвижения эндоскопа через носоглотку, трахею крупные бронхи без труда можно определить количество слизи, равно как и степень отека слизистой оболочки и бронхоспазм. В дополнение к исследованию просвета дыхательных путей, одним из больших преимуществ бронхоскопии является возможность взятия проб из крупных и мелких воздухоносных путей и альвеол. Полученные образцы затем анализируются на предмет их клеточных и неклеточных составляющих.
В последние годы в случаях подозрения на диффузное воспалительное заболевание бронхоальвеолярный лаваж (БАЛ) с использованием эндоскопа или специальной трубки приобрел несколько большую популярность, чем более традиционные методы получения образцов, такие как аспирация трахеи. В течение многих лет считалось, что получение проб из нижних отделов трахеи предоставляет репрезентативную информацию о состоянии альвеол и малых воздухоносных путей, так как свободные клетки дыхательных путей из периферического легкого в конечном счете вымываются по направлению к трахее для удаления.
Однако крупное исследование клинических случаев среди молодых спортивных лошадей с низкой работоспособностью, связанной с патологией нижних дыхательных путей, показало, что цитологические и бактериологические результаты имеют плохую корреляцию между образцами, полученными путем трахеальной аспирации и таковыми, полученными методом БАЛ. Исследования показали, что численность разных клеток в цитологических препаратах из трахеальных аспиратов и БАЛ от одной и той же лошади значительно различалась. Это говорит о том, что образцы из трахеального скопления жидкости могут неточно отражать популяцию клеток и выделения, присутствующие внутри малых дыхательных путей и альвеол. Это важно, так как непереносимость физической нагрузки, повреждение дыхательных путей при воспалении и гиперреактивность связаны с заболеванием мелких дыхательных путей, и лучшим методом диагностики является цитология из БАЛ. Кроме того, при бактериальном культивировании трахеальных аспиратов было получено больше положительных результатов, чем при культивировании БАЛ, выполненных в одном и том же случае. Таким образом, нижняя часть трахеи, очевидно, содержит нормальную бактериальную флору, которая может отсутствовать в малых воздухоносных путях и альвеолах. По этим причинам БАЛ становится все более популярным инструментом для оценки воспаления дистальных (малых) дыхательных путей по сравнению с получением образцов методом трахеальной аспирации.
Чтобы обосновать значимость дифференциальной численности клеток в БАЛ как дополнительного диагностического инструмента для оценки дыхательной системы, необходимы другие количественные измерения в дополнение к обычному клиническому обследованию. В течение последних двух десятилетий был подробно изучен синдром эмфиземы, и несколько исследовательских лабораторий по всему миру отчетливо продемонстрировали высокую корреляцию между дифференциацией клеток БАЛ и результатами исследования функции легких и гистаминовой бронхопровокации у страдающих эмфиземой лошадей. В последние годы аналогично охарактеризованная функция легких у молодых спортивных лошадей с неинфекционным воспалительным заболеванием дыхательных путей (IAD) соответствовала этим данным в отношении диагностической пользы бронхоальвеолярного лаважа.
Целью этой главы является обсуждение применения техники бронхоальвеолярного лаважа как инструмента для идентификации и характеристики воспаления в легких у лошадей, которые страдают диффузной патологией легких, такой как IAD молодых спортивных лошадей и синдром эмфиземы у взрослых животных. Кроме того, кратко рассмотрены вирусные и бактериальные болезни легких в аспекте их диагностики методом бронхоальвеолярного лаважа.
ПОКАЗАНИЯ ДЛЯ БРОНХОАЛЬВЕОЛЯРНОГО ЛАВАЖА
Воспаление нижних дыхательных путей у лошадей может развиться по различным причинам. Лошади любого возраста могут страдать инфекционным (бактериальным/вирусным) и неинфекционным IAD и могут демонстрировать различные клинические, физиологические и патологические признаки. В крупном перспективном исследовании 2-3-летних Чистокровных лошадей в тренинге кашель и истечения из носа были на втором месте после хромоты как самая частая причина пропуска тренировочных дней. Неинфекционное IAD является самой распространенной респираторной патологией, которая встречается как у молодых, так и у взрослых спортивных лошадей.
Доминирующий признак IAD - обструкция дыхательных путей в результате скопления выделений, утолщения стенок дыхательных путей, трансформации дыхательных путей и, в конце концов, в запущенных случаях, потеря способности поддержавать диаметр просвета мелких дыхательных путей. Гиперреактивность дыхательных путей является следствием воспалительного процесса и приводит к дальнейшей их обструкции из-за бронхоспазма и другим функциональным отклонениям. У здоровых лошадей бронхоспазм возникает в ответ на ингаляцию аэрозоли гистамина в концентрации 16 мг/мл. Напротив, у более старых лошадей с эмфиземой бронхоконстрикция наступает от ингаляции гистамина в концентрации менее чем 8 мг/мл. У спортивных лошадей в возрасте от 2 до 5 лет с IAD бронхоконстрикция возникает в ответ на ингаляцию гистамина в концентрации всего 2-3 мг/мл, что указывает на еще большую гиперреактивность дыхательных путей. Такая сильная гиперреактивность дыхательных путей коррелирует с повышенным содержанием воспалительных клеток в образцах, полученных при БАЛ, и поэтому БАЛ является чрезвычайно полезным инструментом для исследования природы, основы воспалительных заболеваний дыхательных путей.
Распространенность низкой работоспособности, вследствие проблем с дыхательной системой, существенна, особенно у скаковых лошадей. Частые респираторные отклонения среди этой популяции животных включают IAD, индуцированное нагрузкой легочное кровотечение и дисфункцию верхних дыхательных путей. В этом контексте IAD делает существенный вклад в неудовлетворяющую стандартам спортивную форму, прерывание скачек или тренинга и, в конечном счете, преждевременное завершение спортивной карьеры. Гистологическое исследование препаратов кусочков легких от лошадей старшего возраста (>10 лет) выявило значительное распространение неинфекционного IAD среди данной возрастной группы. Поэтому IAD играет существенную роль в состоянии здоровья и спортивной форме лошадей всех возрастных групп и спортивных дисциплин. Бронхоскопия и бронхоальвеолярный лаваж с целью определения природы и степени такого воспаления чрезвычайно важны, чтобы определиться с соответствующим лечением и прогнозом в каждом случае.
Более редкие патологии, но также значимые для спортивных лошадей всех возрастов - это септические болезни легких, такие как абсцессы легкого и парапневмониче-ский выпот. Абсцессы обычно локализуются в краниальной части правой или левой каудальной доли легкого." Эти болезни могут быть легко распознаны клинически, благодаря наличию повышенной температуры тела, анорексии и болезненности при пальпации грудной клетки. Подозрение на бронхопневмонию или абсцесс легкого подтверждается рентенографически. Однако у таких пациентов по-прежнему имеет ценность бронхоскопия как с диагностической, так и с терапевтической целью. Во время бронхоскопии легко обнаруживается красновато-коричневый слизистый секрет в нижнем отделе трахеи. Аккуратно продвигая эндоскоп глубже в обход этого скопления, проявляя осторожность, чтобы не затронуть эти выделения, часто возможно проследовать за полоской обесцвеченного слизисто-гнойного секрета и идентифицировать конкретный сегментарный бронх-источник. Затем, используя биопсийный канал бронхоскопа, можно ввести полиэтиленовый катетер внутрь конкретного бронха с целью получить стерильную пробу выделений для бактериального посева и цитологического анализа. Как только эта процедура выполнена, можно осуществить вливание в пораженный бронх и немедленное отсасывание небольшого объема жидкости (примерно 200-250 мл за 2 или 3 впрыскивания), чтобы удалить избыток экссудата. Этот процесс называется «туалетом» дыхательных путей, а не бронхоальвеолярным лаважем. Эта процедура приносит терапевтическую пользу, благодаря ослаблению бактериальной атаки и уменьшению экссудативной перегрузки в пораженном регионе легкого. После завершающего отсасывания жидкости и перед выведением эндоскопа можно локально ввести в пораженную область дозу растворенного антибиотика. Эту процедуру можно повторять ежедневно или через день в качестве компонента лечения бактериальной бронхопневмонии в сочетании с системной терапией.
ПРОЦЕДУРА БРОНХОАЛЬВЕОЛЯРНОГО ЛАВАЖА
БАЛ можно выполнять у большинства лошадей в сочна кии со слабой седацией (ксилазин 0.3 0.5 мг/кг внутривенно или ромифидин 0,03- 0.05 мг/кг внутривенно) и анестезией дыхательных путей с помощью местного анестетика (0.4% раствор лидокаина без эпинефрина). Эту процедуру можно проводить, используя бронхоскоп длиной 1,8-2 м или специальную трубку для БАЛ (Bivona Medical Technologies, Gary, Ind.). Когда бронхоскоп или БАЛ-трубка и трахее, достижение бифуркации трахеи обычно провоцирует кашель. Поэтому на этом этапе полезно влить 60 100 мл предварительно разогретого раствора лидокаина (0,4% без эпинефрина) для десенсибилизации кашлевых рецепторов, расположенных в бифуркации После этой инфузии эндоскоп или БАЛ-трубка осторожно, без чрезмерного усилия (это определяется степенью сопротивления к дальнейшему продвижению) вводится глубже. Предварительно разогретый физиологический раствор (200 300 мл) быстро вливается в легкое и затем аспирируется.
Общий объем физиологического раствора для инфузии следует разделить па два отдельных болюса, при этом стараясь между каждым болюсом получить настолько много жидкости, насколько это возможно. В целом возврат 40 60% от общего объема инфузата указывает на удовлетворительный БАЛ. У лошадей с запущенным заболеванием отбираются небольшие объемы, и существует меньшая тенденция к присутствию меньшего количества пены (сурфактанта). Образцы жидкости БАЛ затем объединяют и храпят на льду, если их обработка невозможна в течение 1 часа после получения. Следует оценить жидкость макроскопически, чтобы выявить какой-либо хлопьевидный дебрис или изменение цвета. Одну или две пробирки для сыворотки или с этилендиаминтетрауксусиой кислотой (EDTA) заполняют жидкостью ВАЛ и центрифугируют (1500 оборотов/мин в течение 10 минут); после удаления супернатанта изготавливают мазки из капли осадка, которые затем высушивают на воздухе. При приготовлении мазков стекла необходимо быстро высушить па воздухе, используя маленький настольный вентилятор, чтобы хорошо сохранить клеточную морфологию. Изготовленные таким образом мазки могут храниться при комнатной температуре вплоть до 8-10 месяцев с небольшими клеточными изменениями. Высушенные на воздухе мазки для интерпретации клеточных и неклеточных составляющих можно окрасить красителями Diff-Qnik, Paйта-Гимзе, Май Грмнвальда, Лейшмана или Грама. Клеточный профиль и морфология могут служить ключом к природе повреждения дыхательных путей, воспаления и иммунологической реакции легких на инфекции или чужеродные антигены.
ДИФФЕРЕНЦИАЛЬНЫЙ ПОДСЧЕТ КЛЕТОК В БАЛ И ИХ ИНТЕРПРЕТАЦИЯ
В полевых условиях объем введенной жидкости часто различается, варьируя от 60 до 300 мл стерильного фи зиологического раствора на один ВАЛ. Кроме того, у лошадей с сильным бронхосназмом объем изъятой жидкости может быть значительно уменьшен. В силу этих обстоятельств эффект разбавления мешает точно подсчитать общую численность ядерных клеток, и с учетом большого диапазона значений TaKoii подсчет представляет малую клиническую ценность в интерпретации воспалительных состоянии легких и считается не имеющим диагностического значения.
С другой стороны, дифференциальная численность типов клеток почти не подвержена влиянию при разбавлении и имеет ценность для характеристики патологического повышения численности конкретных клеточных популяции. Таким образом, с помощью дифференциального подсчета клеток, возможно идентифицировать характерные черты септических, несентических и вирусных воспалительных заболеваний дыхательных путей, что помогает при принятии решения относительно лечебного подхода в каждом конкретном случае. Были установлены диапазоны значений для дифференциальной численности клеток БАЛ у здоровых лошадей, лошадей с эмфиземой и спортивных лошадей с плохой работоспособностью. В каждой из соответствующих групп присутствуют характерные цитологические признаки.
Дифференциальный подсчет клеток у здоровых лошадей
Диапазоны значений дифференциальных численностей клеток БАЛ были установлены при получении образцов методом БАЛ у лошадей, не страдающих респираторным заболеванием, что было подтверждено различными методами. включая клиническое обследование, проверку функции легких и в некоторых случаях отсутствием гиперреактивности дыхательных путей в ответ на бронхопровокацию аэрозолем гистамина (рис. 8.2-1). У молодых лошадей (возраст 6 лет) популяция нейтрофилов может составлять в среднем до 15% у здоровых животных (на основании вышеописанных методов диагностики) с соответствующим снижением процентного содержания популяции макрофагов и лимфоцитов.
Отклонения в дифференциальной численности клеток
Синдром эмфиземы является часто дианостируемым респираторным заболеванием у взрослых лошадей с характерным анамнезом, клиническими признаками, отклонениями при проверке функции легких и гиперреактивностью дыхательных путей Лошади с обострением эмфиземы имеют по меньшей мере 23% нейтрофилов в БАЛ (рис. 8.2-2). Однако в таких случаях нейтрофилы зачастую составляют более трети дифференциальной численности всех воспалительных клеток и играют основную роль в клиническом синдроме и упомянутой гиперреактивности дыхательных путей. Цитологические препараты БАЛ у страдающих эмфиземой лошадей часто имеют обильный слизистый фон с множеством нетоксических и апоптирующих (стареющих) нейтрофилов. за ключенных внутри этой слизи. В БАЛ у страдающих эмфиземой лошадей, кроме повышенного количества нейтрофилов, также имеет место значительное увеличение общей численности тучных клеток, эозинофилов, лимфоцитов, макрофагов и эпителиальных клеток. Эти клетки необходимо распознать и оценить отдельно от нейтрофилов. Численность слущенных эпителиальных клеток обычно увеличена в результате поражения слизи стой ободочки из-за тяжелою воспалительного процесса У лошадей, страдающих эмфиземой, в дополнение к они сапным выше клеточным составляющим в БАЛ-препаратах час го присутствуют неклеточные структуры, такие как спирали Куршманна, которые указывают на хроническое несептическое воспалительное заболевание дыхательных путей.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
БАЛ, несомненно, становится мощным вспомогательным диагностическим инструментом, помогающим в диагностике клинических и субклинических заболеваний нижних дыхательных путей, таких как неинфекционное воспалительное заболевание дыхательных путей у молодых спортивных лошадей и рецидивирующая обструкция дыхательных путей, или эмфизема, у лошадей старшего воз-рас та. Дифференциальная численность клеток БАЛ для здоровых лошадей чет ко установлена с применением общепринятых стандартизированных процедур, и любое отклонение цитологических профилей от нормальных значений помотает распознать широкий диапазон несептических воспалительных процессов Хотя в настоящее время клиницисты назначают определенное лечение на основании цитологических данных клеточного дифференциала БАЛ, более углубленные познания относительно различных нарушений в будущем смогут позволить работающим с лошадьми врачам предоставлять более точную прогностическую информацию в отношении респираторных боле шей тренерам, спортсменам и владельцам. К тому же у большинства молодых и взрослых спортивных лошадей с обильным количеством белого слизисто-гнойного секрета в дыхательных путях и заметно повышенным процентным содержанием нейтрофилов в клеточном дифференциале не удается обнаружить септический процесс. Скорее, такие случаи демонстрируют несептическое воспалительное заболевание дыхательных путей.
Лаваж бронхоальвеолярный (франц lavage, от лат. lavo мыть, промывать) - бронхоскопический способ получения смыва с поверхности мельчайших бронхов (бронхиол) и альвеолярных структур легких для цитологического, микробиологического, биохимического и иммунологического исследований. Лаваж бронхоальвеолярный , являющийся диагностической процедурой, следует отличать от бронхиального лаважа - лечебного промывания крупных и мелких бронхов при различных заболеваниях (например, при гнойном бронхите, альвеолярном протеинозе, бронхиальной астме).
Исследование бронхоальвеолярного смыва с помощью цитологических и иммунологических методов позволяет установить определенные изменения жизнеспособности клеток, их функциональной активности и соотношений между отдельными клеточными элементами, что дает возможность судить об этиологии и активности патологического процесса в легких. При заболеваниях, характеризующихся образованием специфических клеток и телец (например, злокачественные опухоли легких, асбестоз, гемосидероз, гистиоцитоз X), информативность цитологического исследования бронхоальвеолярных смывов может быть приравнена к информативности биопсии. При микробиологическом исследовании бронхоальвеолярных смывов могут быть выявлены возбудители туберкулеза, пневмоцистоза; при биохимическом - зависящие от природы заболевания и его активности изменения в содержании белков, липидов, диспропорции в соотношении их фракций, нарушения активности ферментов и их ингибиторов. Особенно информативно комплексное применение перечисленных методов исследования бронхоальвеолярных смывов.
Наибольшее значение лаважа бронхоальвеолярного имеет для диагностики диссеминированных процессов в легких; саркоидоза (при медиастинальной форме саркоидоза с отсутствием рентгенологических изменений и легких исследование бронхоальвеолярного смыва позволяет во многих случаях обнаружить поражение легочной ткани); диссеминированного туберкулеза; метастатических опухолевых процессов; асбестоза; пневмоцистоза, экзогенного аллергического и идиопатического фиброзирующего альвеолитов; редких заболеваний (гистиоцитоза X, идиопатического гемосидероза, альвеолярного микролитиаза, альвеолярного протеиноза). Лаваж бронхоальвеолярный может успешно применяться для уточнения диагноза и при ограниченных патологических процессах в легких (например, злокачественных опухолях, туберкулезе), а также при хроническом бронхите и бронхиальной астме.
Так как лаваж бронхоальвеолярный проводится в ходе бронхоскопии , следует учитывать противопоказания к ней. Риск исследования не должен превышать его необходимости для уточнения диагноза. Собственно лаваж бронхоальвеолярный противопоказан при значительном количестве гнойного содержимого в бронхиальном дереве, определяемом как клинически, так и эндоскопически.
Бронхоальвеолярный лаваж выполняют как при использовании жесткого бронхоскопа под общей анестезией, так и при фибробронхоскопии под местной анестезией, после визуального исследования трахеи и бронхов. Промывную жидкость вводят в выбранный сегментарный бронх с последующей ее вакуум-аспирацией. Технически удобнее вливать жидкость в III сегмент (при положении больного лежа) и IV, V и IX сегменты (при положении сидя).
При проведении лаважа бронхоальвеолярного с использованием жесткого бронхоскопа (рис. 1 ) через его тубус вводят металлический направитель (под углом в 20° или 45° в зависимости от выбранного сегментарного бронха) и через него - рентгеноконтрастный катетер № 7 или № 8, продвигая его вперед на 3-4 см до бронхов 5-6-го порядка или как бы заклинивая их. Положение катетера можно контролировать на рентгенотелевизионном экране. Через катетер в выбранный сегмент легкого с помощью шприца порциями по 20 мл вливают стерильный изотонический раствор хлорида натрия с рН 7,2-7,4 и температурой 38-40°.
Объем промывной жидкости зависит от количества бронхоальвеолярного смыва, необходимого для проведения намеченных исследований. Применять менее 20 мл промывающего раствора нецелесообразно, т.к. при этом не достигается адекватный смыв с бронхоальвеолярных структур. Как правило, общее количество раствора составляет 100-200 мл . После введения каждой порции раствора проводят вакуум-аспирацию смыва с помощью электроотсоса в стерильную градуированную емкость. При фибробронхоскопии промывную жидкость вводят через фибробронхоскоп, установленный в устье выбранного сегментарного бронха, дозами по 50 мл ; аспирацию проводят через биопсийный канал фибробронхоскопа.
Бронхоальвеолярный лаваж атравматичен, хорошо переносится, опасных для жизни осложнений при его проведении не отмечено. Примерно у 19% больных после лаважа бронхоальвеолярного наблюдается субфебрилитет в течение суток. В редких случаях развивается аспирационная пневмония.
Полученный бронхоальвеолярный смыв необходимо быстро доставить в соответствующие лаборатории для проведения исследований. Если это невозможно, то допускается хранение смыва в течение нескольких часов в холодильнике при температуре от-6° до +6°; смыв, предназначенный для исследования неклеточных компонентов, может длительно находиться в замороженном состоянии.
Для проведения цитологического исследования 10 мл бронхоальвеолярного смыва сразу после его получения фильтруют через 4 слоя стерильной марли или мелкую сетку в центрифужную пробирку. Затем 10 капель профильтрованного смыва смешивают на часовом стекле с 1 каплей жидкости Самсона и заполняют счетную камеру. Подсчитывая клеточные элементы по всей камере, устанавливают их число в 1 мл смыва. Клеточный состав бронхоальвеолярного смыва (эндопульмональная цитограмма) определяют при микроскопическом исследовании осадка лаважной жидкости, полученного при центрифугировании, на основании подсчета не менее 500 клеток с использованием иммерсионного объектива. При этом учитывают альвеолярные макрофаги, лимфоциты, нейтрофилы, эозинофилы, базофилы. Клетки бронхиального эпителия в связи с их незначительным количеством в смывах не подсчитывают.
В бронхоальвеолярном смыве у здоровых некурящих лиц в среднем содержится 85-98% альвеолярных макрофагов, 7-12% лимфоцитов, 1-2% нейтрофилов и менее 1% эозинофилов и базофилов; общее количество клеток варьирует от 0,2× 10 6 до 15,6× 10 6 в 1 мл . У курящих значительно увеличены общее количество клеток и процентное содержание лейкоцитов, альвеолярные макрофаги находятся в активированном (фагоцитирующем) состоянии,
Изменения эндопульмональной цитограммы имеют определенную направленность в зависимости от этиологии и активности заболевания легких. Установлено, что умеренное повышение числа лимфоцитов (до 20%) с одновременным снижением количества альвеолярных макрофагов возможно при первичном туберкулезе органов дыхания (бронхоадените, милиарном туберкулезе легких) и острых формах вторичного туберкулеза легких (инфильтративном туберкулезе). У больных хроническими формами туберкулеза легких в бронхоальвеолярном смыве отмечается повышение количества нейтрофилов (до 20-40%) при сниженном или нормальном содержании лимфоцитов.
При саркоидозе легких в бронхоальвеолярном смыве наблюдается значительное повышение уровня лимфоцитов (до 60-80% в активной фазе заболевания) при уменьшении содержания альвеолярных макрофагов. При хроническом течении и рецидиве заболевания также увеличивается число нейтрофилов. В случае обратного развития процесса на фоне глюкокортикостероидной терапии содержание лимфоцитов снижается, одновременно восстанавливается число альвеолярных макрофагов. Нарастание числа нейтрофилов прогностически неблагоприятно и свидетельствует о развитии пневмофиброза.
При цитологическом исследовании бронхоальвеолярного смыва у больных экзогенным аллергическим альвеолитом устанавливают повышение числа лимфоцитов до 60% и более. Наиболее выраженный лимфоцитоз наблюдается в острой фазе заболевания и после проведения ингаляционного провокационного теста с аллергеном.
Для идиопатического фиброзирующего альвеолита характерно увеличение содержания в бронхоальвеолярном смыве нейтрофилов (до 39-44%). При бронхиальной астме в бронхоальвеолярном смыве число эозинофилов достигает 30-80%, что является объективным диагностическим критерием аллергического воспаления слизистой оболочки бронхов.
У больных хроническим бронхитом в бронхоальвеолярном смыве увеличено количество нейтрофилов, снижено содержание альвеолярных макрофагов, уровень лимфоцитов и эозинофилов сохраняется в пределах нормы. В фазе обострения хронического обструктивного и необструктивного бронхита в бронхоальвеолярном смыве повышается содержание нейтрофилов в среднем до 42%, а в фазе начинающейся ремиссии количество нейтрофилов снижается. У больных с обострением гнойного бронхита резко возрастает количество нейтрофилов (до 76%). уменьшается уровень альвеолярных макрофагов (до 16,8%).
При злокачественных опухолях легких. гемосидерозе, гистиоцитозе X. асбестозе, ксантоматозе в бронхоальвеолярных смывах при цитологическом исследовании могут быть обнаружены специфичные для указанных заболеваний: комплексы опухолевых клеток (рис. 2 ), гемосидерофаги (рис. 3 ), гистиоциты, асбестовые тельца, ксантомные клетки.
Бактериологическое исследование бронхоальвеолярных смывов у больных туберкулезом легких позволяет получить рост микобактерий туберкулеза в 18-20% случаев. Микроскопически в бронхоальвеолярных смывах при окраске по методу Папаниколау и импрегнации серебром можно определить Pneumocystis carinii - возбудитель пневмонии у больных с иммунодефицитными состояниями.
При биохимическом исследовании бронхоальвеолярных смывов у больных туберкулезом легких, саркоидозом легких, экзогенным аллергическим альвеолитом, хроническим бронхитом средние показатели активности протеаз (эластазы, коллагеназы) превышают норму. Активность ингибиторов протеолиза (a 1 -антитрипсин) при этом резко снижается или отсутствует. Высокая активность эластазы сопутствует развитию дистрофических процессов в легких (эмфиземы и пневмосклероза). Исследование эластазы позволяет выявить начальные стадии развития этих процессов и своевременно провести лечение. У больных туберкулезом легких и хроническим бронхитом в бронхоальвеолярных смывах обнаруживают снижение содержания фосфолипидов, составляющих основу поверхностно-активного слоя альвеолярной выстилки. При малых формах туберкулеза легких это может служить дополнительным тестом активности специфического процесса.
Изучение других компонентов бронхоальвеолярных смывов, в т. ч. Т- и В-лимфоцитов, иммунных комплексов, проводится главным образом в научных целях.
Библиогр.: Авцын А.П. и др. Эндопульмональная цитограмма, Сов. мед., № 7, с. 8, 1982, библиогр., Герасин В.А. и др. Диагностический бронхоальвеолярный лаваж. Тер. арх., № 5, с. 102, 1981, библиогр.; Диагностический бронхоальвеолярный лаваж, под ред. А Г. Хоменко. М., 1988, библиогр.
